मानक "एक्सप्रेस विधि द्वारा मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण"। मूत्र में प्रोटीन, प्रयोगशाला परीक्षण

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि मूत्र में कुल प्रोटीन निर्धारित करने के लिए अर्ध-मात्रात्मक तरीकों को संदर्भित करती है। यह विधि हेलर रिंग परीक्षण पर आधारित है, जिसमें यह तथ्य शामिल है कि नाइट्रिक एसिड और मूत्र की सीमा पर, प्रोटीन की उपस्थिति में, यह जम जाता है और एक सफेद रिंग दिखाई देती है।

अभिकर्मकों

50% नाइट्रिक एसिड समाधान या लारियोनोवा का अभिकर्मक.
लारियोनोवा के अभिकर्मक की तैयारी: सोडियम क्लोराइड का एक संतृप्त घोल तैयार करें (गर्म होने पर 100 मिलीलीटर पानी में 20 - 30 ग्राम नमक घोलें, ठंडा होने तक खड़े रहने दें)। सतह पर तैरनेवाला तरल सूखा और फ़िल्टर किया जाता है। 99 मिलीलीटर निस्पंद में 1 मिलीलीटर सांद्र नाइट्रिक एसिड मिलाएं। नाइट्रिक एसिड के बजाय, आप 2 मिलीलीटर सांद्र हाइड्रोक्लोरिक एसिड मिला सकते हैं।

संकल्प की प्रगति

1 - 2 मिलीलीटर नाइट्रिक एसिड (या लारियोनिक अभिकर्मक) को टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है, एसिड को टेस्ट ट्यूब की दीवारों से निकलने दिया जाता है (5 - 8 मिनट), अन्यथा, जब प्रोटीन मूत्र स्तरित होता है, तो मैलापन बन जाएगा मूत्र के साथ टेस्ट ट्यूब की दीवारों पर नाइट्रिक एसिड के मिश्रण के कारण, जो एक अलग रिंग के निर्माण को रोकता है। इसलिए, आपको पहले एसिड के साथ टेस्ट ट्यूब की एक श्रृंखला तैयार करनी चाहिए। एक पिपेट का उपयोग करके, परखनली की दीवार पर समान मात्रा में फ़िल्टर किए गए तरल की सावधानीपूर्वक परत लगाएं। साफ़ मूत्र, इस बात का ध्यान रखें कि परखनली में मौजूद तरल पदार्थ में हलचल न हो। दूसरे और तीसरे मिनट के बीच दो तरल पदार्थों के इंटरफेस पर एक पतली सफेद अंगूठी की उपस्थिति लगभग 0.033 ग्राम/लीटर की सांद्रता पर प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करती है। लेयरिंग समय की गणना एक चौथाई मिनट के रूप में की जाती है।

यदि परत चढ़ाने के बाद छल्ला 2 मिनट से पहले दिखाई देता है, तो मूत्र को पानी से पतला करना चाहिए और पहले से ही पतला मूत्र को फिर से परत में डालना चाहिए। मूत्र के पतला होने की डिग्री का चयन रिंग के प्रकार, यानी उसकी चौड़ाई, सघनता और प्रकट होने के समय के आधार पर किया जाता है। यदि धागे जैसी अंगूठी 2 मिनट से पहले दिखाई देती है, तो मूत्र को 2 बार पतला किया जाता है, यदि यह चौड़ा है - 4 बार, यदि यह कॉम्पैक्ट है - 8 बार, आदि। मूत्र का पतलापन एक मापने वाले अपकेंद्रित्र ट्यूब में किया जाता है, जिसमें मूत्र डाला जाता है 1 मिलीलीटर का निशान और निशान में पानी मिलाकर कितनी बार पतला किया जाता है। टेस्ट ट्यूब की सामग्री को पाश्चर पिपेट और गुब्बारे के साथ अच्छी तरह मिलाया जाता है। यदि मूत्र को पतला करते समय मैलापन दिखाई देता है, तो मिश्रण को फिर से फ़िल्टर किया जाना चाहिए और केवल स्पष्ट फ़िल्टर को नाइट्रिक एसिड के साथ स्तरित किया जाना चाहिए। प्रोटीन सांद्रता की गणना तनुकरण की डिग्री से 0.033 को गुणा करके की जाती है और ग्राम प्रति लीटर (जी/एल) में व्यक्त की जाती है। मूत्र के ऐसे तनुकरण का चयन करें जिससे कि जब इसे नाइट्रिक एसिड पर परत किया जाए तो दूसरे-तीसरे मिनट में एक छल्ला दिखाई दे।

यदि पहले और चौथे मिनट के बीच बिना पतला या पतला मूत्र के साथ एक छल्ला बनता है, तो आप मूत्र को अतिरिक्त रूप से पतला न करने के लिए एर्लिच-अल्थौसेन सुधार का उपयोग कर सकते हैं (इससे समय की बचत होती है)। लेखकों ने धागे जैसी अंगूठी की उपस्थिति का समय निर्धारित करने और गणना में समय सुधार पेश करने का प्रस्ताव रखा। इस मामले में, प्रोटीन की मात्रा की गणना तनुकरण और सुधार की डिग्री से 0.033 ग्राम/लीटर को गुणा करके की जाती है।

जब एक वलय बनता है, तो 1 मिनट बीतने से पहले, एक आंशिक तनुकरण करना आवश्यक होता है, अर्थात् 1.5 बार (दो भाग मूत्र और 1 भाग पानी)। मूत्र में प्रोटीन की मात्रा की गणना करते समय इस तनुकरण को भी ध्यान में रखा जाता है।

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि का उपयोग करके मूत्र में कुल प्रोटीन निर्धारित करने का एक उदाहरण।

जब मूत्र को अभिकर्मक पर परत किया जाता है, तो तुरंत एक चौड़ी अंगूठी बन जाती है। मूत्र को 4 बार पतला करें (1 भाग मूत्र + 3 भाग पानी), परत; तुरंत ही एक धागे जैसी अंगूठी प्राप्त हो जाती है। मौजूदा तनुकरण को 2 गुना और पतला करना आवश्यक है; इस तनुकरण की परत चढ़ाने पर 1.5 मिनट के बाद एक छल्ला बनता है। तुम्हें और अधिक प्रजनन करने की आवश्यकता नहीं है।

प्रोटीन की गणना: मूत्र को 4 और 2 बार पतला किया गया, इसलिए 8 बार। प्रोटीन की मात्रा 0.033*8*1 1/4 = 0.33 ग्राम/लीटर है

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव पद्धति के नुकसान:

• व्यक्तिपरकता,
• श्रम तीव्रता,
• मूत्र पतला होने के कारण प्रोटीन सांद्रता निर्धारित करने की सटीकता में कमी आती है।

यह सभी देखें:

साहित्य:

• हैंडबुक "क्लिनिक में प्रयोगशाला अनुसंधान के तरीके" संस्करण। प्रो वी.वी. मेन्शिकोवा। - मॉस्को, "मेडिसिन", 1987
• एल. वी. कोज़लोव्स्काया, ए. यू. ट्यूटोरियलनैदानिक ​​प्रयोगशाला अनुसंधान विधियों पर. मॉस्को, मेडिसिन, 1985
• ए. हां. अल्थौज़ेन, "क्लिनिकल प्रयोगशाला डायग्नोस्टिक्स" - मॉस्को, मेडगिज़, 1959
• ए. हां. हुबिना, एल. पी. इलिचेवा और सह-लेखक, "क्लिनिकल प्रयोगशाला अध्ययन", मॉस्को, "मेडिसिन", 1984

समाधान: 50% नाइट्रोजन घोल या लारियन घोल। निर्धारण प्रक्रिया: परीक्षण ट्यूबों की एक पंक्ति को एक स्टैंड में रखा जाता है और 1 मिलीलीटर नाइट्रोजन समाधान डाला जाता है, 1 मिलीलीटर मूत्र डाला जाता है, अभिकर्मक पर परत लगाई जाती है और समय नोट किया जाता है जब एक अंगूठी दिखाई देती है, हम अंगूठी की उपस्थिति का समय रिकॉर्ड करते हैं; . यदि वलय चौड़ा है, तो मूत्र को पतला कर लें।

4. 3% सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ मूत्र में प्रोटीन सांद्रता का निर्धारण।

समाधान: 3% सीके, सोडियम क्लोराइड 9%, एल्ब्यूमिन समाधान 10% निर्धारण प्रक्रिया: 1.25 मिलीलीटर साफ मूत्र को दो मापने वाले सेंट्रीफ्यूज ट्यूब "ओ" - प्रयोग और "के" - नियंत्रण में रखा जाता है। प्रायोगिक घोल में 3.75 मिली 3% सल्फोसैलिसिलिक एसिड घोल और नियंत्रण घोल में 3.75 मिली 0.9% सोडियम क्लोराइड घोल मिलाएं। 5 मिनट के लिए छोड़ दें, और फिर 590 - 650 एनएम (नारंगी या लाल फिल्टर) की तरंग दैर्ध्य पर एफईसी पर 5 मिमी की परत मोटाई के साथ एक क्यूवेट में फोटोमीटराइज़ करें, प्रयोग बनाम नियंत्रण। गणना अंशांकन अनुसूची या तालिका के अनुसार की जाती है। विधि का सिद्धांतइस तथ्य पर आधारित है कि सल्फोसैलिसिलिक एसिड वाला प्रोटीन गंदलापन पैदा करता है, जिसकी तीव्रता सीधे प्रोटीन सांद्रता के समानुपाती होती है।

5. मूत्र में ग्लूकोज का पता लगाना गेन्स-अकिमोव परीक्षण। सिद्धांत: ग्लूकोज, जब क्षारीय वातावरण में गर्म किया जाता है, तो कॉपर डाइहाइड्रॉक्साइड को कम कर देता है ( पीला रंग) कॉपर मोनोहाइड्रॉक्साइड (नारंगी-लाल रंग) में। अभिकर्मक की तैयारी: 1) 13.3 ग्राम रसायन। शुद्ध क्रिस्टलीय कॉपर सल्फेट (CuSO4) . 5 एच 2 ओ) समाधान। 400 मिली पानी में. 2) 50 ग्राम सोडियम हाइड्रॉक्साइड को 400 मिली पानी में घोला जाता है। 3) 15 ग्राम शुद्ध ग्लिसरीन को 200 मिलीलीटर पानी में पतला किया जाता है। पहले और दूसरे घोल को मिलाएं और तुरंत तीसरा डालें। अभिकर्मक रैक. संकल्प की प्रगति: एक परखनली में मूत्र की 1 बूंद और अभिकर्मक की 9 बूंदें डालें और पानी के स्नान में 1-2 मिनट तक उबालें। सकारात्मक परीक्षण: तरल या तलछट का पीला या नारंगी रंग।

6. गुणात्मक परिभाषाग्लूकोज ऑक्सीडेज विधि का उपयोग करके मूत्र में ग्लूकोज। विधि का सिद्धांत: ग्लूकोज ऑक्सीडेज की उपस्थिति में ग्लूकोज का ऑक्सीकरण होता है, प्रतिक्रिया के अनुसार: ग्लूकोज + ओ 2 ग्लाइकोनोलेंटम + एच 2 ओ 2। पेरोक्सीडेज की क्रिया के तहत परिणामी पेरोक्साइड एच एक रंगीन उत्पाद बनाने के लिए सब्सट्रेट को ऑक्सीकरण करता है।

जोड़ें और 37 0 सी पर 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। सीपीके, 5 मिमी क्यूवेट को देखें।

फिर गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है: सी ऑप = एक्सट ऑप . सीएसटी/ एक्ट एसटी.

7. लेस्ट्रेड परीक्षण द्वारा मूत्र में कीटोन बॉडी का पता लगाना।लेस्ट्रेड सॉल्यूशन का एक पाउडर या टैबलेट एक ग्लास स्लाइड (स्केलपेल की नोक पर) पर लगाया जाता है, और उस पर मूत्र की 2-3 बूंदें डाली जाती हैं। यदि कीटोन निकाय मौजूद हैं, तो गुलाबी से बैंगनी रंग दिखाई देगा। नमूने का मूल्यांकन एक सफेद पृष्ठभूमि पर किया जाता है।

8. एमिडोपाइरिन के 5% अल्कोहल समाधान के साथ परीक्षण करके मूत्र में रक्त वर्णक का पता लगाना।

1.5% शराब समाधानएमिडोपाइरिन (0.5 ग्राम एमिडोपाइरिन 96% अल्कोहल के 10 मिलीलीटर में घुला हुआ) 2.3% पेरोक्साइड समाधानहाइड्रोजन, 1.5 ग्राम हाइड्रोपाइराइट को 50 मिलीलीटर पानी में घोल दिया जाता है) प्रक्रिया: 2-3 मिलीलीटर एसिटिक ईथर अर्क या हिलाया हुआ अनफ़िल्टर्ड मूत्र 5% एमिडोपाइरिन घोल की 8-10 बूँदें और 8-10 बूँदें एक परखनली में डाला जाता है 3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड का समाधान जोड़ा जाता है; परिणाम को 2-3 मिनट से पहले ध्यान में रखें यदि इसका रंग ग्रे-बैंगनी है तो इसे सकारात्मक माना जाता है।

न्यूबॉयर परीक्षण द्वारा मूत्र में यूरोबिलिन का पता लगाना।

यह एर्लिच के अभिकर्मक के साथ यूरोबिलिनोजेन की रंग प्रतिक्रिया पर आधारित है, जिसमें 2 ग्राम पैराडिमिथाइलैमिनोबेनाल्डिहाइड और 100 मिलीलीटर हाइड्रोक्लोरिक एसिड समाधान (200 ग्राम एल) होता है। निर्धारण प्रक्रिया: एर्लिच के समाधान की कुछ बूंदों को ताजा उत्सर्जित मूत्र के कई मिलीलीटर में जोड़ा जाता है (मूत्र के 1 मिलीलीटर और घोल के प्रति 1 मिलीलीटर पर। पहले 30 सेकंड में लाल रंग की उपस्थिति यूरोबिलिनोजेन में वृद्धि का संकेत देती है। आम तौर पर, रंग बाद में दिखाई देता है या पूरी तरह से अनुपस्थित होता है। जब मूत्र खड़ा होता है, तो यूरोबिलिनोजेन यूरोबिलिन में बदल जाता है और नमूना गलत नकारात्मक हो सकता है। नमूने को गर्म नहीं किया जा सकता है, क्योंकि पोर्फिरिन, इंडोल और दवाओं के साथ एल्डिहाइड के साइड कॉम्प्लेक्स यौगिक बन सकते हैं।

रोसिन परीक्षण द्वारा मूत्र में बिलीरुबिन का पता लगाना।

आयोडीन का अल्कोहल घोल (10 ग्राम): 1 ग्राम क्रिस्टलीय आयोडीन को 100 मिलीलीटर की क्षमता वाले 20-30 मिलीलीटर 96 ग्राम रेक्टिफाइड अल्कोहल में घोलें, और फिर अल्कोहल के साथ निर्धारण प्रक्रिया में डालें एक रासायनिक परीक्षण ट्यूब में 4-5 मिलीलीटर परीक्षण मूत्र डालें और उस पर सावधानीपूर्वक आयोडीन का अल्कोहल घोल डालें (यदि मूत्र में सापेक्ष घनत्व कम है, तो इसे आयोडीन के अल्कोहल घोल में डाला जाना चाहिए यदि इसमें बिलीरुबिन है)। तरल पदार्थों के बीच की सीमा, एक हरे रंग की अंगूठी होगी (एंटीपायरिन लेने पर, साथ ही जब मूत्र में सोडा होता है, तो रक्त वर्णक परीक्षण सकारात्मक हो जाता है) एक स्वस्थ व्यक्ति में, यह परीक्षण नकारात्मक होता है।

शुष्क रसायन विधि (मोनो-पॉलीटेस्ट) का उपयोग करके मूत्र परीक्षण।

सिद्धांत. यह विधि बफर समाधान में संकेतक के रंग पर प्रोटीन के प्रभाव पर आधारित है, जिसके परिणामस्वरूप डाई का रंग पीले से नीला हो जाता है।

मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति के लिए प्रतिक्रिया करते समय और संकेतक पेपर का उपयोग करके पीएच निर्धारित करते समय, निम्नलिखित निर्देशों का पालन करने की सिफारिश की जाती है:

1. मूत्र को अच्छी तरह से धोए गए बर्तनों में एकत्र करें।
2. ताज़ा एकत्रित, परिरक्षक-मुक्त मूत्र का उपयोग करें।
3. पेंसिल केस को निकालने के बाद उसे सावधानीपूर्वक बंद कर दें। आवश्यक मात्राकागज की सूचक पट्टियाँ.
4. संकेतक क्षेत्रों को अपनी उंगलियों से न छुएं।
5. केवल लेबल पर बताई गई समाप्ति तिथि के भीतर ही उपयोग करें।
6. संकेतक कागज के भंडारण के नियमों का पालन करें।
7. निर्देशों में दिए गए निर्देशों के अनुसार परिणामों का मूल्यांकन करें।

मूत्र शुष्क रसायन विश्लेषक का उपयोग करके मूत्र परीक्षण करना।

संकल्प की प्रगति. संकेतक कागज की एक पट्टी को पेंसिल केस से निकाला जाता है और परीक्षण किए जा रहे मूत्र में डुबोया जाता है ताकि दोनों संकेतक क्षेत्रों को एक साथ गीला किया जा सके। 2-3 सेकंड के बाद, पट्टी को एक सफेद कांच की प्लेट पर रख दिया जाता है। पेंसिल केस पर रंग पैमाने का उपयोग करके तुरंत पीएच का आकलन करें। रंग पैमाने पर पीएच मान 6.0 (या उससे कम) से मेल खाता है; 7.0; 8.0; 9.0.

मूत्र की तैयारी, मूत्र तलछट से सूक्ष्म परीक्षण के लिए अनुमानित तरीके से तैयारी तैयार करना।

जब अनुमानित विधि का उपयोग करके मूत्र तलछट की सूक्ष्म जांच की जाती है सामान्य विश्लेषणऔर ल्यूकोसाइटुरिया और हेमट्यूरिया की डिग्री के अधिक सटीक मूल्यांकन के लिए गठित तत्वों की मात्रात्मक गिनती।

माइक्रोस्कोपी के लिए मूत्र तलछट तैयार करने के नियम।

मूत्र के पहले सुबह के हिस्से की सूक्ष्म जांच की जाती है।

प्रारंभिक मिश्रण के बाद, 10 मिलीलीटर मूत्र लिया जाता है और 1500 आरपीएम पर 10 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है।

फिर मूत्र के साथ अपकेंद्रित्र ट्यूब को तेज गति से उलट दिया जाता है, और सतह पर तैरनेवाला तरल जल्दी से एक खाली जार में डाल दिया जाता है।

हिलाएं, एक बूंद कांच की स्लाइड पर रखें और ध्यान से कवरस्लिप से ढक दें।

यदि तलछट में कई परतें होती हैं, तो तैयारी तैयार करें, और फिर दोबारा सेंट्रीफ्यूज करें और प्रत्येक परत से अलग से तैयारी तैयार करें।

यदि आंखों को कोई तलछट दिखाई नहीं देती है, तो मूत्र की एक बूंद को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है और सूक्ष्मदर्शी रूप से जांच की जाती है।

सबसे पहले, सामग्री की जांच कम आवर्धन (आईपिस 7-10, उद्देश्य 8) पर की जाती है, कंडेनसर को नीचे किया जाता है, एपर्चर को थोड़ा संकुचित किया जाता है, फिर तैयारी का विस्तार से अध्ययन किया जाता है उच्च आवर्धन(आईपिस 10.7; उद्देश्य 40)।

14.नेचिपोरेंको के अनुसार मूत्र तलछट का मात्रात्मक अध्ययन।

विधि का उपयोग अव्यक्त, सुस्त सूजन प्रक्रियाओं (पाइलोनेफ्राइटिस, ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस), अव्यक्त पायरिया के लिए किया जाता है। गतिशीलता में रोग प्रक्रिया का अध्ययन करना। उपचार की प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए. विधि के लाभ:तकनीकी रूप से सरल, इसमें बड़ी मात्रा में मूत्र की आवश्यकता नहीं होती है और यह लंबे समय तक चलने वाला होता है। इसके भंडारण का उपयोग बाह्य रोगी अभ्यास में किया जाता है। दायित्व स्थितियाँ: सुबह का मूत्र, मध्यम भाग, अम्लीय घोल (क्षारीय मूत्र में सेलुलर तत्वों का आंशिक विघटन हो सकता है)। 1. मूत्र मिलाएं। 2. 10 मिलीलीटर मूत्र को मापने वाली सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में रखें और 1500 आरपीएम पर 10 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज करें। 3. सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद. अनुभवहीन तरल के शीर्ष को पिपेट करके छोड़ दें। बिल्कुल 1 मिली तलछट। 4. तलछट को अच्छी तरह मिलाया जाता है और गोरियाव का कक्ष भर दिया जाता है। 5. भरने के 3-5 मिनट बाद, गठित तत्वों की गिनती शुरू करें। 6. ल्यूकोसाइट्स की गिनती, एर, ऐपिस 15 के साथ सिलेंडर, चूक के साथ लेंस 8। कंडेनसर, 100 बड़े वर्ग कक्षों में। ल्यूकोसाइट्स, एर को अलग से गिना जाता है, सिलेंडर (कम से कम 4 गोरियाव कक्ष गिने जाते हैं) और माध्यम हटा दिया जाता है। आरिफ़. एक्स=ए x 0.25x 10 6 /ली. सामान्य: ल्यूक। 2-4x 10 6 /ली, एर 1 x 10 6 /ली तक, सिलेंडर 0.02 x 10 6 /ली तक (4 कक्षों के लिए एक)। बच्चों में: ल्यूकेमिया. 2-4x 10 6 /ली तक, एर 0.75 x 10 6 /ली तक, सिलेंडर 0.02 x 10 6 /ली तक।

15. ज़िमनिट्स्की के अनुसार मूत्र परीक्षण

यह परीक्षण किडनी की ध्यान केंद्रित करने की क्षमता निर्धारित करता है। और मूत्र को पतला कर लें। नमूना सील का सार. गतिशील परिभाषा में सापेक्ष घनत्वऔर दिन के दौरान तीन घंटे के हिस्से में मूत्र की मात्रा। परीक्षण का संचालन: खाली करने के बाद मूत्राशयसुबह 6 बजे शौचालय में, रोगी दिन के दौरान हर तीन घंटे में मूत्र को अलग-अलग जार में एकत्र करता है। कुल 8 सर्विंग्स. अनुसंधान की प्रगति: 1. वितरण. मूत्र को घंटे के हिसाब से रखा जाता है और प्रत्येक भाग में मात्रा और सापेक्ष घनत्व निर्धारित किया जाता है। 2. निर्धारित करने के लिए मूत्र की दैनिक मात्रा और पिए गए तरल पदार्थ की मात्रा की तुलना करें। इसके उत्सर्जन का %. 3. दिन और रात के समय के मूत्राधिक्य की गणना करें, इसका योग बनाएं और दैनिक मूत्राधिक्य प्राप्त करें। 4. मात्रा और सापेक्ष में उतार-चढ़ाव की सीमा निर्धारित करें। प्रति दिन मूत्र घनत्व यानी सबसे छोटे हिस्से और सबसे बड़े हिस्से में क्या अंतर है. दिखाओ। स्वस्थ लोगों से नमूने लोग: 1. दैनिक मूत्राधिक्य 800-1500 मि.ली. 2. दिन के समय के मूत्राधिक्य की तुलना में रात के समय के मूत्राधिक्य की प्रबलता होती है। 3. अलग-अलग हिस्सों में मूत्र की मात्रा में उतार-चढ़ाव महत्वपूर्ण है (50 से 400 मिलीलीटर तक)। 4. उतार-चढ़ाव पी 1.003 से 1.028 तक, 0.008 से अधिक होना चाहिए। फ़ंक्शन के साथ गुर्दे की विफलता: हाइपोस्थेनुरिया, हाइपोइसोस्टेनुरिया, आइसोस्थेनुरिया, हाइपरस्थेनुरिया, ओलिगुरिया, औरिया, नॉक्टुरिया।

16. मल के सामान्य गुणों का वर्णन |

आम तौर पर, मल में पाचन तंत्र के स्राव और उत्सर्जन उत्पाद, अपचित या आंशिक रूप से पचे हुए भोजन के अवशेष और माइक्रोबियल वनस्पतियां शामिल होती हैं। मल की मात्रा 100-150 ग्राम है। स्थिरता घनी है। आकार बेलनाकार है. गंध सामान्य है. भूरा रंग। आर-टियन - तटस्थ, थोड़ा क्षारीय या थोड़ा अम्लीय (पीएच 6.5-7.0-7.5)। बलगम-अनुपस्थित. रक्त-अनुपस्थित. अपाच्य भोजन के कोई अवशेष नहीं हैं।

मूत्र में प्रोटीन: निर्धारण के तरीके

पैथोलॉजिकल प्रोटीनुरिया गुर्दे और मूत्र पथ के रोगों के सबसे महत्वपूर्ण और स्थायी लक्षणों में से एक है। मूत्र में प्रोटीन सांद्रता का निर्धारण मूत्र परीक्षण का एक अनिवार्य और महत्वपूर्ण तत्व है। प्रोटीनुरिया की पहचान और मात्रात्मक मूल्यांकन न केवल कई प्राथमिक और माध्यमिक किडनी रोगों के निदान में महत्वपूर्ण है; समय के साथ प्रोटीनमेह की गंभीरता में परिवर्तन का आकलन रोग प्रक्रिया के पाठ्यक्रम और उपचार की प्रभावशीलता के बारे में जानकारी देता है। मूत्र में प्रोटीन का पता लगाना, यहां तक ​​​​कि थोड़ी मात्रा में भी, संभावित किडनी या मूत्र पथ की बीमारी के लिए खतरे का संकेत देना चाहिए और बार-बार परीक्षण की आवश्यकता होती है। विशेष रूप से उल्लेखनीय मूत्र परीक्षण की व्यर्थता है और विशेष रूप से, सभी के अनुपालन के बिना मूत्र प्रोटीन का निर्धारण इसके संग्रहण के नियम.

मूत्र में प्रोटीन निर्धारित करने की सभी विधियों को निम्न में विभाजित किया जा सकता है:

उच्च गुणवत्ता,

अर्ध-मात्रात्मक,

मात्रात्मक.

गुणात्मक तरीके

सभी मूत्र में प्रोटीन के लिए गुणात्मक परीक्षण विभिन्न भौतिक और रासायनिक कारकों के प्रभाव में प्रोटीन की विकृतीकरण की क्षमता के आधार पर। यदि परीक्षण किए जा रहे मूत्र के नमूने में प्रोटीन मौजूद है, तो या तो मैलापन या फ्लोकुलेंट तलछट दिखाई देती है।

जमावट प्रतिक्रिया के आधार पर मूत्र में प्रोटीन निर्धारित करने की शर्तें:

मूत्र अम्लीय होना चाहिए। क्षारीय मूत्र को एसिटिक एसिड (5 - 10%) की कुछ (2 - 3) बूंदों से अम्लीकृत किया जाता है।

पेशाब साफ़ होना चाहिए. पेपर फ़िल्टर के माध्यम से बादल को हटा दिया जाता है। यदि मैलापन दूर नहीं होता है, तो टैल्कम पाउडर या जला हुआ मैग्नेशिया (लगभग 1 चम्मच प्रति 100 मिलीलीटर मूत्र) मिलाएं, हिलाएं और छान लें।

एक गुणात्मक नमूना दो परीक्षण ट्यूबों में किया जाना चाहिए, उनमें से एक नियंत्रण है।

आपको प्रसारित प्रकाश में काली पृष्ठभूमि पर धुंध की तलाश करनी चाहिए।

मूत्र में प्रोटीन के निर्धारण के लिए गुणात्मक तरीकों में शामिल हैं:

हेलर रिंग परीक्षण,

15-20% सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ परीक्षण करें,

उबलने का परीक्षण, और अन्य।

जैसा कि कई अध्ययनों से पता चलता है, इनमें से कोई भी नहीं बड़ी संख्या मेंमूत्र में प्रोटीन के गुणात्मक निर्धारण के लिए ज्ञात विधियाँ विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम प्राप्त करने की अनुमति नहीं देती हैं। इसके बावजूद, रूस में अधिकांश डीडीएल में इन विधियों का व्यापक रूप से स्क्रीनिंग के रूप में उपयोग किया जाता है - मूत्र में सकारात्मक गुणात्मक प्रतिक्रिया के साथ, प्रोटीन का मात्रात्मक निर्धारण बाद में किया जाता है। गुणात्मक प्रतिक्रियाओं में से, हेलर परीक्षण और सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ परीक्षण का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है, लेकिन सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ परीक्षण को आमतौर पर पैथोलॉजिकल प्रोटीनूरिया की पहचान के लिए सबसे उपयुक्त माना जाता है। इसकी श्रम तीव्रता और अवधि के कारण उबलने का परीक्षण वर्तमान में व्यावहारिक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है।

अर्ध-मात्रात्मक विधियाँ

को अर्ध-मात्रात्मक तरीके संबंधित:

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि,

नैदानिक ​​परीक्षण स्ट्रिप्स का उपयोग करके मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण।

ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि हेलर रिंग परीक्षण पर आधारित है, इसलिए इस विधि में हेलर परीक्षण जैसी ही त्रुटियां देखी जाती हैं।

वर्तमान में, मूत्र में प्रोटीन निर्धारित करने के लिए डायग्नोस्टिक स्ट्रिप्स का तेजी से उपयोग किया जा रहा है। एक पट्टी पर मूत्र में प्रोटीन के अर्ध-मात्रात्मक निर्धारण के लिए, साइट्रेट बफर में डाई ब्रोमोफेनॉल ब्लू का उपयोग अक्सर एक संकेतक के रूप में किया जाता है। मूत्र में प्रोटीन की मात्रा नीले-हरे रंग की तीव्रता से आंकी जाती है जो मूत्र के साथ प्रतिक्रिया क्षेत्र के संपर्क के बाद विकसित होती है। परिणाम का मूल्यांकन दृष्टि से या मूत्र विश्लेषक का उपयोग करके किया जाता है। शुष्क रसायन विज्ञान विधियों (सरलता, विश्लेषण की गति) की महान लोकप्रियता और स्पष्ट लाभों के बावजूद, सामान्य रूप से मूत्र विश्लेषण और विशेष रूप से प्रोटीन निर्धारण के ये तरीके गंभीर कमियों के बिना नहीं हैं। उनमें से एक, जो नैदानिक ​​जानकारी के विरूपण का कारण बनता है, अन्य प्रोटीन की तुलना में एल्ब्यूमिन के लिए ब्रोमोफेनॉल ब्लू संकेतक की अधिक संवेदनशीलता है। इस संबंध में, परीक्षण स्ट्रिप्स को मुख्य रूप से चयनात्मक ग्लोमेरुलर प्रोटीनुरिया का पता लगाने के लिए अनुकूलित किया जाता है, जब लगभग सभी मूत्र प्रोटीन एल्ब्यूमिन होता है। परिवर्तनों की प्रगति और चयनात्मक ग्लोमेरुलर प्रोटीनुरिया के गैर-चयनात्मक (मूत्र में ग्लोब्युलिन की उपस्थिति) में संक्रमण के साथ, प्रोटीन निर्धारण के परिणाम वास्तविक मूल्यों की तुलना में कम आंके जाते हैं। यह तथ्य इसका उपयोग करना संभव नहीं बनाता है यह विधिसमय के साथ गुर्दे (ग्लोमेरुलर फिल्टर) की स्थिति का आकलन करने के लिए मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण। ट्यूबलर प्रोटीनुरिया के साथ, प्रोटीन निर्धारण के परिणामों को भी कम करके आंका जाता है। परीक्षण स्ट्रिप्स के साथ प्रोटीन परीक्षण प्रोटीनुरिया के निम्न स्तर का एक विश्वसनीय संकेतक नहीं है (वर्तमान में उपलब्ध अधिकांश परीक्षण स्ट्रिप्स 0.15 ग्राम/लीटर से कम मूत्र प्रोटीन सांद्रता का पता लगाने में सक्षम नहीं हैं)। स्ट्रिप्स पर प्रोटीन निर्धारण के नकारात्मक परिणाम मूत्र में ग्लोब्युलिन, हीमोग्लोबिन, यूरोमुकोइड, बेंस जोन्स प्रोटीन और अन्य पैराप्रोटीन की उपस्थिति को बाहर नहीं करते हैं।

ग्लाइकोप्रोटीन की उच्च सामग्री वाले बलगम के गुच्छे (उदाहरण के लिए, सूजन प्रक्रियाओं के दौरान)। मूत्र पथ, पायरिया, बैक्टीरियूरिया) पट्टी के संकेतक क्षेत्र पर बस सकता है और गलत-सकारात्मक परिणाम दे सकता है। गलत सकारात्मक परिणाम उच्च सांद्रता के कारण भी हो सकते हैं यूरिया. खराब रोशनी और खराब रंग दृष्टि के कारण गलत परिणाम आ सकते हैं।

इस संबंध में, डायग्नोस्टिक स्ट्रिप्स का उपयोग स्क्रीनिंग प्रक्रियाओं तक ही सीमित होना चाहिए, और उनकी मदद से प्राप्त परिणामों को केवल सांकेतिक माना जाना चाहिए।

मात्रात्मक विधियां

सही मूत्र में प्रोटीन का मात्रात्मक निर्धारण कुछ मामलों में यह एक कठिन कार्य बन जाता है। इसे हल करने की कठिनाइयाँ निम्नलिखित कारकों द्वारा निर्धारित की जाती हैं:

मूत्र में कई यौगिकों की उपस्थिति जो रासायनिक प्रतिक्रियाओं के दौरान हस्तक्षेप कर सकती है;

के दौरान मूत्र प्रोटीन की सामग्री और संरचना में महत्वपूर्ण उतार-चढ़ाव विभिन्न रोग, जिससे पर्याप्त अंशांकन सामग्री का चयन करना कठिन हो जाता है।

नैदानिक ​​​​प्रयोगशालाओं में, मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए तथाकथित "नियमित" तरीकों का मुख्य रूप से उपयोग किया जाता है, लेकिन वे हमेशा संतोषजनक परिणाम नहीं देते हैं।

एक प्रयोगशाला विश्लेषक के दृष्टिकोण से, मूत्र में प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए बनाई गई विधि को निम्नलिखित आवश्यकताओं को पूरा करना चाहिए:

रासायनिक प्रतिक्रिया के दौरान गठित कॉम्प्लेक्स के अवशोषण और नमूने में प्रोटीन सामग्री के बीच सांद्रता की एक विस्तृत श्रृंखला के बीच एक रैखिक संबंध है, जो अनुसंधान के लिए नमूना तैयार करते समय अतिरिक्त संचालन से बच जाएगा;

सरल होना चाहिए, कलाकार की उच्च योग्यता की आवश्यकता नहीं होनी चाहिए, और कम संख्या में संचालन के साथ किया जाना चाहिए;

परीक्षण सामग्री की छोटी मात्रा का उपयोग करते समय उच्च संवेदनशीलता और विश्लेषणात्मक विश्वसनीयता होनी चाहिए;

विभिन्न कारकों के प्रति प्रतिरोधी होना (नमूने की संरचना में उतार-चढ़ाव, दवाओं की उपस्थिति, आदि);

एक स्वीकार्य लागत है;

ऑटो विश्लेषकों के लिए आसानी से अनुकूल होना;

निर्धारण का परिणाम परीक्षण किए जा रहे मूत्र नमूने की प्रोटीन संरचना पर निर्भर नहीं होना चाहिए।

मूत्र में प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए वर्तमान में ज्ञात तरीकों में से कोई भी पूरी तरह से "स्वर्ण मानक" होने का दावा नहीं कर सकता है।

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए मात्रात्मक तरीकों को टर्बिडिमेट्रिक और कलरिमेट्रिक में विभाजित किया जा सकता है।

टर्बिडीमेट्रिक तरीके

टर्बिडिमेट्रिक विधियों में शामिल हैं:

सल्फोसैलिसिलिक एसिड (एसएसए) के साथ प्रोटीन निर्धारण,

ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड (टीसीए) के साथ प्रोटीन निर्धारण,

बेंजेथोनियम क्लोराइड के साथ प्रोटीन का निर्धारण।

टर्बिडिमेट्रिक विधियां अवक्षेपण एजेंटों के प्रभाव में निलंबित कणों के निलंबन के गठन के कारण मूत्र प्रोटीन की घुलनशीलता में कमी पर आधारित हैं। परीक्षण नमूने में प्रोटीन सामग्री का आकलन या तो प्रकाश प्रकीर्णन की तीव्रता से किया जाता है, जो प्रकाश-प्रकीर्णन कणों की संख्या (विश्लेषण की नेफेलोमेट्रिक विधि) द्वारा निर्धारित किया जाता है, या परिणामी निलंबन (विश्लेषण की टर्बिडिमेट्रिक विधि) द्वारा प्रकाश प्रवाह के क्षीणन द्वारा निर्धारित किया जाता है। ).

मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने के लिए अवक्षेपण विधियों में प्रकाश प्रकीर्णन की मात्रा कई कारकों पर निर्भर करती है: अभिकर्मकों के मिश्रण की दर, प्रतिक्रिया मिश्रण का तापमान, माध्यम का पीएच मान, विदेशी यौगिकों की उपस्थिति और फोटोमेट्रिक विधियाँ। प्रतिक्रिया स्थितियों का सावधानीपूर्वक पालन करने से स्थिर कण आकार और अपेक्षाकृत प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणामों के साथ एक स्थिर निलंबन का निर्माण होगा।

कुछ दवाएं मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए टर्बिडीमेट्रिक तरीकों के परिणामों में हस्तक्षेप करती हैं, जिससे तथाकथित "गलत सकारात्मक" या "गलत नकारात्मक" परिणाम सामने आते हैं। इनमें कुछ एंटीबायोटिक्स (बेंज़िलपेनिसिलिन, क्लोक्सासिलिन, आदि), रेडियोकॉन्ट्रास्ट आयोडीन युक्त पदार्थ और सल्फोनामाइड दवाएं शामिल हैं।

टर्बिडिमेट्रिक विधियों को मानकीकृत करना कठिन है और अक्सर गलत परिणाम देते हैं, लेकिन इसके बावजूद, कम लागत और अभिकर्मकों की उपलब्धता के कारण वर्तमान में प्रयोगशालाओं में इनका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। रूस में प्रोटीन निर्धारण के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि सल्फोसैलिसिलिक एसिड है।

वर्णमिति विधियाँ

प्रोटीन की विशिष्ट रंग प्रतिक्रियाओं के आधार पर, कुल मूत्र प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए वर्णमिति विधियाँ सबसे संवेदनशील और सटीक हैं।

इसमे शामिल है:

ब्यूरेट प्रतिक्रिया,

लोरी विधि,

प्रोटीन के साथ कॉम्प्लेक्स बनाने के लिए विभिन्न रंगों की क्षमता पर आधारित विधियाँ:

पोंसेउ एस,

कूमैसी ब्रिलियंट ब्लू

पाइरोगैलोल लाल.

कलाकार के दृष्टिकोण से, अनुसंधान के एक बड़े प्रवाह के साथ प्रयोगशाला के दैनिक कार्य में, बड़ी संख्या में संचालन के कारण ब्यूरेट विधि असुविधाजनक है। साथ ही, विधि को उच्च विश्लेषणात्मक विश्वसनीयता की विशेषता है, यह सांद्रता की एक विस्तृत श्रृंखला में प्रोटीन के निर्धारण और तुलनीय संवेदनशीलता के साथ एल्ब्यूमिन, ग्लोब्युलिन और पैराप्रोटीन का पता लगाने की अनुमति देता है, जिसके परिणामस्वरूप ब्यूरेट विधि को माना जाता है। संदर्भ और मूत्र में प्रोटीन का पता लगाने के लिए अन्य विश्लेषणात्मक तरीकों की तुलना के लिए इसकी अनुशंसा की जाती है। मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए ब्यूरेट विधि अधिमानतः नेफ्रोलॉजी विभागों की सेवा करने वाली प्रयोगशालाओं में की जाती है, और इसका उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां अन्य तरीकों का उपयोग करके निर्धारण के परिणाम संदिग्ध होते हैं, साथ ही नेफ्रोलॉजी रोगियों में दैनिक प्रोटीन हानि की मात्रा निर्धारित करने के लिए भी किया जाता है।

लोरी विधि, जो ब्यूरेट विधि से अधिक संवेदनशील है, प्रोटीन अणु में अमीनो एसिड टायरोसिन और ट्रिप्टोफैन के लिए ब्यूरेट प्रतिक्रिया और फोलिन प्रतिक्रिया को जोड़ती है। अपनी उच्च संवेदनशीलता के बावजूद, मूत्र में प्रोटीन सामग्री का निर्धारण करते समय यह विधि हमेशा विश्वसनीय परिणाम प्रदान नहीं करती है। इसका कारण मूत्र के गैर-प्रोटीन घटकों (अक्सर अमीनो एसिड, यूरिक एसिड, कार्बोहाइड्रेट) के साथ फोलिन के अभिकर्मक की गैर-विशिष्ट बातचीत है। डायलिसिस या प्रोटीन अवक्षेपण द्वारा इन और अन्य मूत्र घटकों को अलग करने से मूत्र में प्रोटीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए इस विधि का सफलतापूर्वक उपयोग किया जा सकता है। कुछ दवाएं - सैलिसिलेट्स, क्लोरप्रोमेज़िन, टेट्रासाइक्लिन इस पद्धति को प्रभावित कर सकती हैं और अध्ययन के परिणामों को विकृत कर सकती हैं।

पर्याप्त संवेदनशीलता, अच्छी प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता और डाई बाइंडिंग द्वारा प्रोटीन निर्धारण में आसानी इन तरीकों को आशाजनक बनाती है, लेकिन अभिकर्मकों की उच्च लागत प्रयोगशालाओं में उनके व्यापक उपयोग को रोकती है। वर्तमान में, रूस में पाइरोगैलोल रेड विधि तेजी से व्यापक होती जा रही है।

प्रोटीनुरिया के स्तर का अध्ययन करते समय, आपको यह ध्यान में रखना होगा कि प्रोटीनमेह निर्धारित करने के विभिन्न तरीकों में कई मूत्र प्रोटीनों के लिए अलग-अलग संवेदनशीलता और विशिष्टता होती है।

अनुभवजन्य डेटा के आधार पर, दो अलग-अलग तरीकों से प्रोटीन निर्धारित करने और निम्नलिखित सूत्रों में से एक का उपयोग करके सही मूल्य की गणना करने की सिफारिश की जाती है: प्रोटीनूरिया = 0.4799 बी + 0.5230 एल; प्रोटीनुरिया = 1.5484 बी - 0.4825 एस; प्रोटीनूरिया = 0.2167 एस + 0.7579 एल; प्रोटीनुरिया = 1.0748 पी - 0.0986 बी; प्रोटीनुरिया = 1.0104 पी - 0.0289 एस; प्रोटीनूरिया = 0.8959 पी + 0.0845 एल; जहां B, Coomassie G-250 के साथ माप परिणाम है; एल - लोरी अभिकर्मक के साथ माप परिणाम; पी पायरोगैलोल मोलिब्डेट के साथ माप का परिणाम है; एस सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ माप का परिणाम है।

दिन के अलग-अलग समय में प्रोटीनूरिया के स्तर में स्पष्ट उतार-चढ़ाव को ध्यान में रखते हुए, साथ ही मूत्र में प्रोटीन की सांद्रता की मूत्राधिक्य पर निर्भरता, मूत्र के अलग-अलग हिस्सों में इसकी अलग-अलग सामग्री, वर्तमान में, गुर्दे की विकृति के मामले में , यह मूत्र में प्रोटीन की दैनिक हानि से प्रोटीनुरिया की गंभीरता का आकलन करने के लिए प्रथागत है, अर्थात, तथाकथित दैनिक प्रोटीनमेह निर्धारित करने के लिए। इसे g/दिन में व्यक्त किया जाता है।

यदि दैनिक मूत्र एकत्र करना असंभव है, तो मूत्र के एक हिस्से में प्रोटीन और क्रिएटिनिन की सांद्रता निर्धारित करने की सिफारिश की जाती है। चूँकि क्रिएटिनिन उत्सर्जन की दर पूरे दिन काफी स्थिर रहती है और मूत्र उत्पादन की दर में परिवर्तन से प्रभावित नहीं होती है, प्रोटीन सांद्रता और क्रिएटिनिन सांद्रता का अनुपात स्थिर रहता है। यह अनुपात दैनिक प्रोटीन उत्सर्जन के साथ अच्छी तरह से मेल खाता है और इसलिए, प्रोटीनूरिया की गंभीरता का आकलन करने के लिए इसका उपयोग किया जा सकता है। आम तौर पर, प्रोटीन/क्रिएटिनिन अनुपात 0.2 से कम होना चाहिए। प्रोटीन और क्रिएटिनिन को g/l में मापा जाता है। प्रोटीन-क्रिएटिनिन अनुपात का उपयोग करके प्रोटीनुरिया की गंभीरता का आकलन करने की विधि का एक महत्वपूर्ण लाभ 24 घंटे के मूत्र के असंभव या अपूर्ण संग्रह से जुड़ी त्रुटियों का पूर्ण उन्मूलन है।

साहित्य:

ओ. वी. नोवोसेलोवा, एम. बी. पायतिगोर्स्काया, यू. ई. मिखाइलोव, "प्रोटीनमेह की पहचान और मूल्यांकन के नैदानिक ​​पहलू", नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला के प्रमुख की पुस्तिका, नंबर 1, जनवरी 2007।

ए. वी. कोज़लोव, "प्रोटीनुरिया: इसके पता लगाने के तरीके," व्याख्यान, सेंट पीटर्सबर्ग, एसपीबीएमएपीओ, 2000।

वी. एल. एमानुएल, “गुर्दे की बीमारियों का प्रयोगशाला निदान। मूत्र सिंड्रोम," - नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला के प्रमुख की निर्देशिका, संख्या 12, दिसंबर 2006।

में और। पुपकोवा, एल.एम. प्रसोलोवा - मूत्र में प्रोटीन निर्धारित करने के तरीके (साहित्य डेटा की समीक्षा)

क्लिनिकल प्रयोगशाला विधियों की पुस्तिका। ईडी। ई. ए. कोस्ट. मॉस्को, "मेडिसिन", 197