Beljakovine v urinu, laboratorijske preiskave. Kvalitativno določanje beljakovin v urinu

Proteinurija je pojav beljakovin v urinu v koncentracijah, ki omogočajo odkrivanje s kvalitativnimi metodami.

Razlikovati

• Ledvična proteinurija in
• Ekstrarenalna (postrenalna) proteinurija

Ledvična proteinurija

Ledvična proteinurija je posledica poškodbe glomerularnega filtra ali disfunkcije zvitega tubulnega epitelija.

Obstaja selektivna in neselektivna proteinurija odvisno od razmerja določenih beljakovin v plazmi in urinu, njihove molekulske mase in naboja.

Selektivna proteinurija

Selektivna proteinurija se pojavi z minimalno (pogosto reverzibilno) motnjo glomerularnega filtra in jo predstavljajo beljakovine z nizko molekulsko maso (molekulska masa ni višja od 68.000) - albumin, ceruloplazmin, transferin.

Neselektivna proteinurija

Neselektivna proteinurija je pogostejša pri hujši poškodbi filtra, ko se začnejo izgubljati velike molekularne beljakovine. Selektivnost proteinurije je pomemben diagnostični in prognostični znak.

Ledvična proteinurija je lahko:

• organsko in
• funkcionalni (fiziološki).

Organska ledvična proteinurija

Organska ledvična proteinurija se pojavi, ko pride do organske poškodbe nefrona. Glede na prevladujoči mehanizem nastanka lahko ločimo nekatere vrste organske proteinurije.

Glomerularna proteinurija

Glomerularna proteinurija - zaradi poškodbe glomerularnega filtra se pojavi pri glomerulonefritisu in nefropatijah, povezanih s presnovnimi ali žilnimi boleznimi. (glomerulonefritis, hipertenzija, infekcijski in alergijski dejavniki, srčna dekompenzacija)

Tubularna proteinurija

Tubulna proteinurija je povezana z nezmožnostjo tubulov, da ponovno absorbirajo beljakovine z nizko molekulsko maso v plazmi, ki so prešle skozi nespremenjeni glomerularni filter. (amiloidoza, akutna tubularna nekroza, intersticijski nefritis, Fanconijev sindrom)

Prerenalna proteinurija

Prerenalna proteinurija (prekomerna) - se razvije v prisotnosti nenavadno visoke plazemske koncentracije beljakovin z nizko molekulsko maso, ki jo normalni glomeruli filtrirajo v količini, ki presega fiziološko sposobnost reabsorpcije tubulov. (mielom, mišična nekroza, hemoliza eritrocitov)

Funkcionalna ledvična proteinurija

Funkcionalna ledvična proteinurija ni povezana z boleznijo ledvic in ne zahteva zdravljenja.

Funkcionalna proteinurija vključuje:

• korakanje,
• čustven,
• hladno,
• zastrupitev,
• ortostatski (samo pri otrocih in samo v stoječem položaju).

Ekstrarenalna (postrenalna) proteinurija

Z zunajledvično (postrenalno) proteinurijo lahko beljakovine vstopijo v urin iz sečil in spolnih poti (s kolpitisom in vaginitisom - z nepravilno zbranim urinom). IN v tem primeru to ni nič drugega kot primes vnetnega eksudata.

Ekstrarenalna proteinurija praviloma ne presega 1 g / dan in je pogosto prehodna.

Diagnozo ekstrarenalne proteinurije olajšata test s tremi kozarci in urološki pregled.

Postrenalna proteinurija se pojavi pri cistitisu in uretritisu.

Metode za določanje beljakovin v urinu

Nujen pogoj Pri izvajanju testov za prisotnost beljakovin je urin popolnoma prozoren.

Kvalitativni vzorci

Test s sulfosalicilno kislino

V dve epruveti vlijemo 3-4 ml filtriranega urina. V epruveto dodajte 6–8 kapljic 20 % raztopine sulfosalicilne kisline. Druga cev je krmilna. Na temnem ozadju primerjaj kontrolno epruveto s poskusno. Če so v vzorcih urina prisotne beljakovine, se pojavi opalescentna motnost.

Rezultat je prikazan na naslednji način:

• šibko pozitivna reakcija (+),
• pozitivno (++),
• izrazito pozitivno (+++).

Vzorec je zelo občutljiv.

Uporabite lahko tudi suh vzorec, ko več mililitrom urina dodate več kristalov sulfosalicilne kisline ali filtrirnega papirja, predhodno impregniranega z raztopino te kisline.

Lažni pozitivni rezultati je lahko posledica jemanja jodovih pripravkov, sulfanilamidov, velikih odmerkov penicilina in prisotnosti sečne kisline v visokih koncentracijah v urinu.

Test z dušikovo kislino (Gellerjev test)

V epruveto vlijemo 1-2 ml 50% raztopine dušikove kisline, nato pa na kislino nanesemo enako količino urina. Ko je beljakovina prisotna, se na meji med dvema tekočinama pojavi bel obroč. Včasih se nekoliko nad mejo med tekočinama oblikuje rdečkast obroč. vijolična zaradi prisotnosti uratov. Uratni obroč se za razliko od beljakovinskega obroča raztopi pri rahlem segrevanju.

Svetel vzorec

Test Bright boil in presejalni testi proteinurije (suhi kolorimetrični vzorci) ne zahtevajo skoraj nobenih reagentov.

Ko se urin, ki vsebuje beljakovine, prekuha, denaturira in tvori oblaku podobno oborino ali kosmiče, ki za razliko od fosfatnih soli niso topni v 6 % ocetni kislini. Presejalni testi temeljijo na sposobnosti beljakovine (albumina), da spremeni barvo papirja, prevlečenega z indikatorjem (običajno bromofenol modrim) in pufrom. Neposredna povezava med intenzivnostjo barve indikatorskega papirja (Albufan, Albutest - Češka; Labstix, Multistix - ZDA; Comburtest - Nemčija) in količino beljakovin nam omogoča približno oceno količine proteinurije. Vendar trenutno uporabljeni presejalni testi niso brez pomanjkljivosti. Zlasti bromofenol modro ne zazna beljakovine Bence Jones.

Kvantitativne metode

Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda

Metoda temelji na kvalitativnem vzorcu z dušikovo kislino. Postopek testiranja je opisan zgoraj. Pojav tankega obroča na meji obeh tekočin med 2. in 3. minuto po plastenju kaže na prisotnost 0,033 g/l beljakovin v urinu (koncentracija beljakovin v urinu je običajno izražena v ppm, tj. gramov na liter). Če se obroč pojavi prej kot 2 minuti, je treba urin razredčiti z vodo. Izberite takšno razredčitev urina, da se ob nanosu na dušikovo kislino v 2-3 minutah pojavi obroček. Stopnja redčenja je odvisna od širine in kompaktnosti obroča ter časa njegovega pojava.

Koncentracijo beljakovin izračunamo tako, da 0,033 g/l pomnožimo s stopnjo razredčitve urina (tabela 8).

Roberts-Stolnikova metoda redčenja ima številne pomanjkljivosti: je subjektivna, delovno intenzivna in natančnost določanja koncentracije beljakovin se zmanjšuje z redčenjem urina.

Najbolj priročne in natančne metode so nefelometrične in biuretne metode.

Nefelometrična metoda

Temelji na lastnosti beljakovine, da tvori motnost s sulfosalicilno kislino, katere intenzivnost je sorazmerna s koncentracijo beljakovine. 1,25 ml filtriranega urina vlijemo v graduirano epruveto in dodamo 3% raztopino sulfosalicilne kisline do prostornine 5 ml, dobro premešamo. Po 5 minutah se izmeri ekstinkcija na FEK-M (ali kateremkoli drugem fotometru) pri valovni dolžini 590–650 nm (oranžni ali rdeči filter) proti kontroli v kiveti s slojem debeline 0,5 cm Za kontrolo 1,25 ml filtriranega urina (enako), ki mu dodamo izotonično raztopino natrijevega klorida do volumna 5 ml.

Najprej se izdela umeritvena krivulja odvisnosti vrednosti ekstinkcije od koncentracije proteina. Za pripravo različnih koncentracij beljakovin se uporablja standardna raztopina albumina (iz človeškega ali govejega seruma). Izpolni delovni list.

Biuretna metoda

Temelji na sposobnosti beljakovin, da z bakrovim sulfatom in jedkimi alkalijami tvorijo biuretni kompleks vijolične barve, katerega intenzivnost barve je neposredno sorazmerna s količino beljakovin. 2 ml urina dodamo 2 ml raztopine trikloroocetne kisline, da oborimo beljakovine in centrifugiramo. Supernatant se odlije. K oborini (beljakovini) dodamo 4 ml 3% raztopine NaOH in 0,1 ml 20% raztopine bakrovega sulfata, premešamo in centrifugiramo. Vijolična supernatantna tekočina se fotometrira pri valovni dolžini 540 nm (zeleni filter) proti destilirani vodi v kiveti s plastjo debeline 1,0 cm in se določi iz tabele, dobljene eksperimentalno (umeritvena krivulja je izdelana kot v prejšnji). metoda).

Ortostatski test

Indicirano pri sumu na ortostatsko proteinurijo in nefroptozo. Po popolnem praznjenju Mehur Oseba ostane v vodoravnem položaju 2 uri, nato pa da en (kontrolni) del urina, ne da bi vstal. V naslednjih 2 urah preiskovanec neprekinjeno hodi, ohranja položaj maksimalne ledvene lordoze (drži palico za spodnjim delom hrbta), nato pa daje drugi del urina. V obeh delih urina se določi koncentracija beljakovin in vsebnost beljakovin v gramih, v primeru nefroptoze pa se določi število rdečih krvnih celic v 1 ml. Z ortostatsko proteinurijo se v drugem delu odkrije proteinurija ali povečanje začetne vsebnosti beljakovin v gramih. Pojav hematurije, pogosto v kombinaciji s proteinurijo v sledovih v drugem delu, je značilen za nefroptozo.

Določanje uroproteinov Bence Jones

Proteini Bence Jonesa so toplotno labilni paraproteini z nizko molekulsko maso (relativna molekulska masa 20.000–45.000), ki jih najdemo predvsem pri multiplem mielomu in Waldenströmovi makroglobulinemiji. So lahke verige imunoglobulinov. Zaradi nizke molekulske mase L-verige zlahka preidejo iz krvi skozi nedotaknjen ledvični filter v urin in jih je tam mogoče zaznati z reakcijo termoprecipitacije. Študijo je priporočljivo izvesti le, če je test s sulfosalicilno kislino pozitiven. Določitev se izvede na naslednji način. V 10 ml urina dodamo 3-4 kapljice 10% raztopine ocetne kisline in 2 ml nasičene raztopine natrijevega klorida, previdno segrevamo v vodni kopeli in postopoma povečujemo temperaturo. Če so v urinu beljakovine Bence Jones, se pri temperaturi 45–60 ° C pojavi razpršena motnost ali nastane gosta bela oborina. Pri nadaljnjem segrevanju do vrelišča se oborina raztopi, pri ohlajanju pa se ponovno pojavi. Ta test ni dovolj občutljiv in ga je treba testirati z elektroforezo in imunoelektroforezo.

Številne bolezni se pojavijo brez izrazitega klinične manifestacije, torej določanje beljakovin v urinu z namenom pravočasnega odkrivanja in zdravljenja patološko stanje je pomembna točka za praktično medicino.

Beljakovine v urinu lahko določimo s kvalitativno in kvantitativno metodo.

Kvalitativne metode

Trenutno jih je znanih okoli 100 kvalitativne reakcije za beljakovine. Vključujejo obarjanje beljakovin s fizičnim ali kemičnim delovanjem. Pri pozitivni reakciji pride do motnosti.

Najbolj informativni testi so:

• S sulfosalicilno kislino. Velja za najbolj občutljivega in z njegovo pomočjo je mogoče določiti tudi najmanjše količine beljakovinskih teles v urinu. Opis rezultata s prisotnostjo beljakovin v sledovih je označen z izrazom "opalescenca", z večjo količino - "šibko pozitiven", "pozitiven" in z veliko izgubo beljakovin v urinu - "močno pozitivna reakcija" .
• Z nadomestkom kisline - aseptolom. Raztopino snovi dodamo urinu in ko se na meji raztopin oblikuje obroč, pravimo, da je vzorec pozitiven.
• Geller. Proizvedeno z uporabo raztopine dušikove kisline. Rezultat postopka razlagamo podobno kot pri Aseptolu. Včasih je lahko prisoten obroč, ko je urat prisoten v preskusni tekočini.
• Z ocetno kislino z dodatkom kalijevega žveplovega dioksida. Če je koncentracija urina pri takem testu visoka, se razredči, sicer lahko pride do lažno pozitivnega rezultata, saj bo reakcija na urate in sečno kislino.

Nepravilna izvedba takšnega testa lahko pri novorojenčkih pogosto povzroči napačen rezultat, saj se njihov urin tvori z visoko vsebnostjo sečne kisline.

Osnovna pravila pri izvajanju testov so naslednja: potrebno je, da je testirani urin prozoren, ima rahlo kislo okolje (za to se mu včasih doda majhna količina ocetne kisline), obstajati morata dve epruveti za spremljanje.

kvantifikacija

Pri preiskavi urina se s kvantitativnimi metodami določi tudi skupna beljakovina. Teh je kar nekaj, najpogosteje uporabljeni pa so naslednji:

• Esbachova metoda. Uporablja se od 19. stoletja. Da bi to naredili, urin in reagent vlijemo v določeno epruveto. Nato zmes malo pretresemo in pokrito pustimo 24-48 ur. Nastalo oborino preštejemo z delitvijo na epruveti. Pravilen zaključek lahko naredimo le s kislim urinom. Ta tehnika je precej preprosta, vendar nima visoke natančnosti in je zamudna.
• Brandberg-Stolnikova metoda. Na podlagi Hellerjevega testa, ki vam omogoča, da dobite rezultat s koncentracijo beljakovin več kot 3,3 mg%. Kasneje je bila ta metoda spremenjena in poenostavljena.
• Nefelometrične metode za določanje količine beljakovin se pogosto uporabljajo.

Za popolno razumevanje količine beljakovin je najbolje uporabiti urinski test za dnevne beljakovine.

• Za pravilen rezultat prvi jutranji del odlijemo, zbiranje začnemo z drugim delom v eno posodo, ki jo je priporočljivo hraniti v hladilniku.

Zadnji del se zbere zjutraj. Po tem morate izmeriti prostornino, nato temeljito premešati in v kozarec naliti del, ki ne presega 50 ml. To posodo je treba oddati v laboratorij. Poseben obrazec zahteva, da navedete rezultate skupne količine dnevnega urina ter višino in težo bolnika.

Uporaba testnih lističev

Test beljakovin v urinu deluje na principu indikatorjev. Posebni trakovi lahko spreminjajo barvo glede na koncentracijo beljakovin. Primerni so za določanje sprememb, ki se pojavijo ob različnih časih, in se uporabljajo tako doma kot v vseh zdravstvenih in preventivnih ustanovah

Po potrebi se uporabljajo urinski testni trakovi zgodnja opredelitev in spremljanje rezultatov zdravljenja genitourinarnih patologij. Ta diagnostična tehnika je občutljiva in reagira na albumin v njegovi koncentraciji od 0,1 g/l ter vam omogoča, da določite kvalitativne in polkvantitativne spremembe vsebnosti beljakovin v urinu.

Na podlagi rezultatov te diagnoze lahko spremljate učinkovitost terapije, jo spremenite in predpišete potrebno dieto.

Vse metode za določanje beljakovin v urinu temeljijo na koagulaciji beljakovin pod vplivom kemičnih ali toplotnih dejavnikov. Če je v urinu beljakovina, se pojavi motnost, katere stopnja je odvisna od količine beljakovin.

A) kakovostni vzorci Določitev beljakovin v urinu je obvezna.

1. Preskus z dušikovo kislino– previdno dodajte enako količino urina v epruveto z 1-2 ml 50% raztopine dušikove kisline, pri tem pa poskušajte ne stresati tekočine. Če so v urinu prisotne beljakovine, se na meji obeh tekočin pojavi bel obroč, ki je bolje viden na črnem ozadju.

2. Test s sulfasalicilno kislino– V epruveto vlijemo 4-5 ml urina in dodamo 8-10 kapljic reagenta. Če je v urinu beljakovina, se lahko glede na njeno količino pojavi motnost ali flokulacija.

3. Ekspresni test (suhi diagnostični vzorec)– trak indikatorskega papirja Albufan potopimo v urin, ki ga testiramo, tako da hkrati zmočimo obe indikatorski coni (zgornja cona je za določanje pH, spodnja cona je za določanje beljakovin). Po 2-3 sekundah se trak položi na belo stekleno ploščo. Ocena se izvede 60 sekund po omočenju traku z urinom z uporabo barvne lestvice, ki je natisnjena na peresnici z indikatorskimi trakovi.

B) kvantitativni vzorci– izvaja se v tistih delih urina, kjer so med kvalitativno določitvijo odkrili beljakovine; določanje poteka v sloju supernatanta po centrifugiranju

Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda– V epruveto vlijemo 1-3 ml 50% raztopine dušikove kisline in enako količino urina previdno nanesemo po steni. Čas se beleži na štoparici. Če se obroč na meji med tekočinami oblikuje takoj ali prej kot 2 minuti po plastenju, je treba urin razredčiti z vodo. Po tem se beljakovine ponovno določijo v razredčenem urinu. Redčenje se izvaja, dokler se med 2. in 3. minuto ne pojavi bel obroč, ko se razredčeni urin nanese na dušikovo kislino. Količina beljakovin se določi tako, da se 0,033 ppm pomnoži s stopnjo redčenja.

18. Tehnika odvzema brisov za floro, gonokoke, trihomonade, citološki pregled, KPI.

Tehnika jemanja brisov za floro: material odvzamemo iz kanala materničnega vratu in iz sečnice s posebno ščetko pod vizualnim nadzorom. Dobljeni vzorec takoj položimo na predmetno stekelce in zmeljemo.

Tehnika odvzema brisov za Trichomonas: najprej vzamemo material s strganjem iz sluznice sečnice (po predhodni 1-minutni masaži pubične simfize) in zadnjega forniksa nožnice, nato vaginalni del materničnega vratu obrišemo s sterilno brisom, navlaženim s fiziološko raztopino, odstranimo sluznični čep in kanal materničnega vratu previdno vstavite sondo do globine največ 1,0-1,5 cm in vzemite strganje iz sluznice materničnega vratu.

Tehnika jemanja brisov za gonokoke: material vzamemo iz sečnice, Bartholinovih žlez in parauretralnih kanalov, potem ko jih obrišemo z vatirano palčko, namočeno v fiziološko raztopino, vaginalno pinceto ali posebno sondo. Material se vzame iz rektuma s topo žlico. V primeru kronične in torpidne gonoreje se pred študijo izvede provokacija, da se poveča verjetnost prepoznavanja patogena.

Med menstruacijo materiala ne morete vzeti z vatirano palčko.

Tehnika odvzema brisov za citološko preiskavo: s površine eksocerviksa, vagine in vulve vzamemo bris z lopatko, z endocerviksa z endo-ščetko. Material je nanesen v tankem sloju na posebej obdelano razmaščeno steklo in obdelan s posebno sestavo, ki preprečuje izsušitev celic. Preparate pobarvamo po metodi Papanicolaou (t. i. bris Papa) in pregledamo pod mikroskopom.

Kariopiknotični indeks– odstotek površinskih celic s piknotičnimi jedri proti celicam z vezikularnimi (nepiknotičnimi) jedri. CPI na začetku folikularne faze menstrualni ciklus 25-30%, do ovulacije 60-70%, v lutealni fazi se zmanjša na 25%.

Urin je pomembna biološka tekočina v človeškem telesu. Z njim se odstrani večina presnovnih produktov. Pri zdravem človeku ima njegova sestava razmeroma fiksne vrednosti. Ko se pojavi bolezen, se nekateri kazalci spremenijo, kar lečečim zdravnikom omogoča pojasnitev diagnoze. Testiranje beljakovin v 24-urnem urinu bo pomagalo prepoznati težave z vašimi ledvicami.

Dnevna analiza urina ali dnevna diureza

To je laboratorijski test, ki določa količino sproščene tekočine na dan. Ta metoda se uporablja za oceno stanja delovanja ledvic. Sestava urina:

Vsaka komponenta mora običajno vsebovati določeno količino, odstopanje od katere se šteje za patologijo. Pri preučevanju dnevnega vnosa beljakovin je norma za odrasle moške in ženske enaka. Med normalnim delovanjem ledvic ta snov ne sme priti v urin ali pa lahko vsebuje majhno količino 40-80 mg. Izcedek 150 mg ali več se šteje za patološko. Vendar pa je s starostjo, zlasti po 60 letih, dovoljen rahel presežek. sprejemljiv indikator, in to je povezano z starostne spremembe v organizmu. V nekaterih primerih je odkrivanje beljakovin razloženo z nepravilno pripravo pred zbiranjem biomateriala ali napakami v prehrani. Pri otrocih je norma odvisna od starosti, teže in telesne površine.

splošne informacije

Na podlagi rezultatov laboratorijskih preiskav dnevnega urina se pridobijo naslednji podatki:

• Količina tekočine, ki se sprosti iz telesa čez dan. V povprečju je 1750 ml in lahko niha tako navzdol kot navzgor, odvisno od količine popite tekočine.
• sladkor. Ta indikator je še posebej pomemben za bolnike s sladkorno boleznijo.
• Oksalati. Preseganje dovoljenih meja je preobremenjeno s tvorbo peska in kamnov v ledvicah.
• Metanefrin. Ta snov nastane po razpadu hormonov. Odstopanja od norme v smeri povečanja so znak patologije ledvic, srčno-žilnega sistema in itd.
• Beljakovine. Pri zdravih ljudeh se ta indikator ne sme opaziti v urinu. To je eden od pomembnih parametrov, ki se zazna med dnevno analizo urina. Povišana raven kaže na znake patologije ledvic in bolezni centralnega živčnega sistema. Z laboratorijskimi preiskavami biološke tekočine lahko poleg celotne količine beljakovin zaznamo tudi beljakovinske spojine, ki so prav tako pomembne za pravilno diagnozo.

Indikacije za predpisovanje 24-urnega testa urina za beljakovine

Zaradi dejstva, da se spremembe v kvalitativni in kvantitativni sestavi urina začnejo prej kot simptomi bolezni, analiza omogoča pravočasno odkrivanje patologije. Indikacije za to vrsto raziskav pri odraslih in otrocih so naslednje bolezni:

• amiloidoza (motnja presnove beljakovin);
• sladkorna bolezen;
• nefropatija, ki se kaže kot otekanje nog;
• srčna ishemija;
• odpoved ledvic.

Poleg tega je predpisano, ko bolnik jemlje določena zdravila: aminoglikozide, zaviralce ACE, tiazidne diuretike in nekatera druga zdravila.

Pripravljalna faza

Če želite biti bolj informativni in pridobiti najbolj objektivne informacije na podlagi rezultatov analize dnevnega urina za beljakovine, morate upoštevati določena pravila, ki so obvezna in so naslednja:

• Za en dan ali več odpravite uporabo vitaminskih kompleksov, antikoagulantov in diuretikov.
• Dan prej spremenite prehrano. Izogibajte se začinjeni, mastni in sladki hrani ter alkoholnim in kavnim pijačam.
• Ne darujte biomateriala med menstruacijo.
• Za zbiranje urina kupite posebno posodo v lekarni ali pa jo uporabite Stekleni kozarec, s prostornino najmanj treh litrov.

za analizo beljakovin?

Pravila za zbiranje biomateriala so splošna za odrasle moške in ženske ter otroke, ki so dopolnili določeno starost in lahko samostojno uporabljajo kahlico.

1. Neposredno pred zbiranjem urina je potrebno stranišče zunanjih genitalij.
2. Prvi del biomateriala se ne upošteva. Zabeleži pa se čas jutranjega uriniranja.
3. Zberite vso izločeno tekočino 24 ur. Zbiranje urina se nadaljuje tudi ponoči.
4. Priporočljivo je, da posode z biomaterialom hranite pri temperaturi, ki ni višja od 8 stopinj in ni nižja od 5.
5. Takoj po zbiranju zadnje porcije je treba zbrani urin temeljito premešati.
6. Najprej morate zdravnika vprašati, kako oddati dnevni urinski test za beljakovine v laboratorij. Obstajata dva načina. Približno 100 ml biomateriala se vlije v posodo majhna velikost in odnesemo v laboratorij ali pa celotno dnevno količino dostavimo v veliki posodi.
7. V primerih, ko so spremembe dnevne diureze pomembne, zdravnik priporoča beleženje količine porabljene tekočine v 24 urah.

Kako zbrati dnevni urinski test za beljakovine pri otrocih, mlajših od enega leta? To vprašanje zanima mlade matere. Pri predpisovanju takšne študije za otroke pediatri svetujejo nakup posebne naprave za zbiranje biomateriala, ki se prosto prodaja v lekarnah. Ne smete iztisniti tekočine iz plenic ali ujeti trenutka, ko bi vaš otrok želel urinirati.

Proteinurija ali beljakovine v 24-urnem urinu

Ta izraz se nanaša na visoko raven beljakovinskih snovi v urinu. Uporablja se za spremljanje delovanja ledvic. Obstajajo naslednje vrste proteinurije. Blaga - ni znanilec bolezni in se pojavi iz naravnih razlogov. Zmerna in huda - te vrste kažejo na težave pri delovanju ledvic. V teh primerih poleg beljakovin v 24-urnem testu urina obstajajo simptomi, kot so:

• bolečine v kosteh;
• omotica;
• izguba apetita;
• zaspanost;
• slabost;
• bruhanje;
• huda utrujenost.

Vzroki za pojav beljakovin v urinu:

• odpoved srca;
• bolezni centralnega živčnega sistema;
• hipertiroidizem;
• infekcijski endokarditis.

Na spremembo sestave urina kaže njegov odtenek, pojav belkaste barve je znak prisotnosti albumina, beljakovinske snovi.

Vrste proteinurije

Glavni dejavnik, ki vpliva na pojav beljakovinskih spojin v urinu, so težave pri absorpciji te snovi. Proteinurija se razlikuje:

• Kanalikularni. Pri nekaterih boleznih je absorpcija beljakovin nemogoča ali otežena.
• Glomerularni. V tem primeru se beljakovinske molekule ne zadržijo in se izločijo skupaj s tekočino. Ta pojav je značilen za naslednje patologije: pielonefritis, poškodbe ledvic zaradi toksinov, glomerulonefritis.
• Ekstrarenalno. Prisotna škoda sečila, značilen za uretritis, kolpitis in cistitis.

Za določitev vrste proteinurije se uporablja mikroskopski pregled. Nadalje, če je potrebno, zdravnik predpiše druge vrste preiskav, vključno z ultrazvokom, slikanjem z magnetno resonanco in drugimi strojnimi metodami.

Beljakovine v urinu med nosečnostjo. Vzroki

Beljakovine so gradbeni material, ki sodeluje pri različnih procesih v telesu posameznika. Njegovo odkrivanje v urinu velja za znak razvoja patoloških procesov. Ledvična telesca izgubijo celovitost in beljakovine vstopijo v urin skupaj s škodljivimi snovmi, vzrok za to okvaro pa je vnetni proces v ledvicah. Analiza urina vam omogoča, da takoj prepoznate bolezen in jo preverite pravilno delovanje ledvic v najbolj odgovornem in pomembnem obdobju v življenju ženske. Vsako, tudi najmanjše odkrivanje beljakovin pri nosečnicah v dnevnem testu urina je znak začetka razvoja patologije. Vzroki za njegov pojav so naslednje bolezni:

• glomerulonefritis;
• eritematozni lupus;
• nefritis;
• hipertenzija;
• sladkorna bolezen.

Kot tudi infekcijski in vnetni procesi v ledvicah, njihove mehanske poškodbe, opekline, hipotermija, zastrupitev s strupenimi snovmi ali zdravljenje malignih novotvorb s kemoterapevtskimi zdravili pred nosečnostjo.

Varna nosečnost

Za diagnosticiranje bolezni ledvic se uporablja preprosta metoda - dnevni urinski test za beljakovine. Izpolnjevanje pogojev za pravilno zbiranje urin je obvezen za vsako nosečnico.

1. Zunanje genitalije morajo biti čiste. Lahko se umijete z običajnim milom. Uporaba antiseptikov ali zeliščnih pripravkov je prepovedana, saj bodo izkrivljali zanesljivost rezultatov.
2. Zberite urin v čisto, suho posodo s širokim vratom.

Če se v urinu odkrije beljakovina, zdravnik predpiše zdravljenje, ki bo zaščitilo plod pred negativnimi učinki bolezni, ki povzroča pojav beljakovinskih snovi v urinu. Nato morate ugotoviti razlog za ta pojav. V večini primerov gre za motnje v delovanju ledvic. Pojav beljakovin v biomaterialu v drugi polovici nosečnosti je eden od simptomov gestoze. Nato se pojavi oteklina in spremembe krvnega tlaka.

• dnevni test urina za beljakovine;
• redni obiski zdravnika;
• nadzor tlaka;
• prehrana, obogatena z vitaminskimi kompleksi;
• zmeren vnos tekočine;
• izogibanje začimbam in po možnosti soli ali njeno količino zmanjšajte na minimum.

Za preventivne namene, pa tudi za zmanjšanje beljakovinskih spojin v urinu, lahko zdravnik predpiše zeliščna zdravila ali zeliščne decokcije, ki imajo diuretični učinek.

Zdravljenje in preprečevanje

Razlago testov zaupajte svojemu zdravniku. Če se odkrije patoloških razlogov pojav beljakovinskih snovi v urinu, je predpisana le potrebna terapija zdravstveni delavec. Ni priporočljivo samozdraviti in se zanesti nekonvencionalne metode. Pri ugotavljanju vzrokov, ki niso povezani s patološkimi procesi, bodite pozorni Posebna pozornost prehrana. Pomembno je vedeti, da je učinkovitost zdravljenja odvisna od pravočasne diagnoze.

26.02.2009

Kurilyak O.A., dr.

Običajno se beljakovine izločajo z urinom v relativno majhna količina običajno ne več kot 100-150 mg/dan.

Dnevna diureza pri zdravem človeku je 1000-1500 ml/dan; tako je koncentracija beljakovin v fizioloških pogojih 8-10 mg/dL (0,08-0,1 g/L).

Skupne beljakovine v urinu predstavljajo tri glavne frakcije - albumin, mukoproteini in globulini.

Albumin v urinu je tisti del serumskega albumina, ki je bil filtriran v glomerulih in se ni ponovno absorbiral v ledvičnih tubulih; Normalno izločanje albumina z urinom je manj kot 30 mg/dan. Drugi glavni vir beljakovin v urinu so ledvični tubuli, zlasti distalni del tubulov. Ti tubuli izločajo dve tretjini celotne količine beljakovin v urinu; od te količine približno 50 % predstavlja glikoprotein Tamm-Horsfall, ki ga izloča epitelij distalnih tubulov in ima pomembno vlogo pri nastajanju sečnih kamnov. Druge beljakovine so prisotne v urinu v majhna količina in izvirajo iz nizkomolekulskih plazemskih proteinov, filtriranih skozi ledvice, ki se ne absorbirajo v ledvičnih tubulih, mikroglobulinov iz ledvičnega tubulnega epitelija (RTE) ter izločkov prostate in nožnice.

Proteinurija, to je povečanje beljakovin v urinu, je eden najpomembnejših simptomov, ki odražajo poškodbo ledvic. Vendar pa lahko proteinurija spremlja tudi številna druga stanja. Zato obstajata dve glavni skupini proteinurije: ledvična (prava) in ekstrarenalna (lažna) proteinurija.

Pri ledvični proteinuriji beljakovine vstopijo v urin neposredno iz krvi zaradi povečane prepustnosti glomerularnega filtra. Ledvična proteinurija se pogosto pojavi pri glomerulonefritisu, nefrozi, pielonefritisu, nefrosklerozi, ledvični amiloidozi, različne oblike nefropatije, na primer nefropatija nosečnosti, stanja z vročino, hipertenzija itd. Proteinurijo lahko odkrijemo tudi pri zdravih ljudeh po težkem fizičnem naporu, hipotermiji in psihološkem stresu. Pri novorojenčkih opazimo fiziološko proteinurijo v prvih tednih življenja, pri asteniji pri otrocih in mladostnikih v kombinaciji s hitro rastjo v starosti 7-18 let pa je možna ortostatska proteinurija (v pokončnem položaju telesa).

V primeru lažne (ekstrarenalne) proteinurije je vir beljakovin v urinu primesi levkocitov, eritrocitov in epitelijskih celic. sečila urotelija. Razgradnja teh elementov, še posebej izrazita pri alkalni reakciji urina, povzroči sproščanje beljakovin v urin, ki je že prešel ledvični filter. Še posebej visoka stopnja posledica lažne proteinurije je primesi krvi v urinu; z obilno hematurijo lahko doseže 30 g/l ali več. Bolezni, ki jih lahko spremljajo ekstrarenalna proteinurija- urolitiaza, tuberkuloza ledvic, tumorji ledvic ali sečil, cistitis, pielitis, prostatitis, uretritis, vulvovaginitis.

Klinična klasifikacija vključuje blago proteinurijo (manj kot 0,5 g/dan), zmerno (0,5 do 4 g/dan) ali hudo (več kot 4 g/dan).

Večina bolnikov z boleznijo ledvic, kot je akutni glomerulonefritis ali pielonefritis, ima zmerno proteinurijo, vendar bolniki z nefrotskim sindromom običajno izločijo več kot 4 g beljakovin v urinu dnevno.

Za kvantitativno določanje beljakovin se uporablja širok spekter metod, zlasti enotna Brandberg-Roberts-Stolnikova metoda, biuretna metoda, metoda s sulfosalicilno kislino, metode z barvilom Coomassie blue, pirogalol rdečim barvilom itd.

Uporaba različnih metod za določanje beljakovin v urinu je povzročila resno zmedo pri razlagi normalnih meja vsebnosti beljakovin v urinu. Ker se v laboratorijih najpogosteje uporabljata dve metodi - s sulfosalicilno kislino in pirogalol rdečim barvilom, bomo obravnavali problem pravilnosti meja norm posebej zanje. Z vidika sulfosalicilne metode v normalnem urinu vsebnost beljakovin ne sme presegati 0,03 g / l, z vidika pirogalolne metode - 0,1 g / l! Razlike so trojne!!!

Nizke vrednosti normalne koncentracije beljakovin v urinu pri uporabi sulfosalicilne kisline so posledica naslednjih točk:

• Umeritvena krivulja je izdelana z uporabo vodne raztopine albumina. Sestava urina se zelo razlikuje od vode: pH, soli, nizkomolekularne spojine (kreatinin, sečnina itd.). Kot rezultat, po Altshulerju, Rakovu in Tkachevu, je lahko napaka pri določanju beljakovin v urinu 3-kratna ali več! Tisti. pravilne rezultate določanja je mogoče dobiti le v primerih, ko ima urin zelo nizko specifična težnost po sestavi in ​​pH je blizu vodi;
• večja občutljivost sulfosalicilne metode na albumin v primerjavi z drugimi beljakovinami (medtem ko, kot je navedeno zgoraj, albumin v običajnih vzorcih urina ne predstavlja več kot 30% skupnih beljakovin v urinu);
• če se pH urina premakne na alkalno stran, pride do nevtralizacije sulfosalicilne kisline, kar povzroči tudi podcenjevanje rezultatov določanja beljakovin;
• hitrost sedimentacije oborin je podvržena znatnim spremembam - pri nizkih koncentracijah beljakovin se obarjanje upočasni, zgodnja ustavitev reakcije pa vodi do podcenjevanja rezultata;
• hitrost reakcije obarjanja je bistveno odvisna od mešanja reakcijske mešanice. Pri visokih koncentracijah beljakovin lahko močno stresanje epruvete povzroči nastanek velikih kosmičev in njihovo hitro sedimentacijo.

Vse zgoraj naštete značilnosti metode vodijo do znatne podcenjenosti koncentracije beljakovin, določene v urinu. Vendar je stopnja podcenjevanja močno odvisna od sestave posameznega vzorca urina. Ker metoda s sulfosalicilno kislino daje podcenjene vrednosti koncentracije beljakovin, je tudi normalna meja za to metodo 0,03 g/l podcenjena za približno trikrat v primerjavi s podatki v tujih referenčnih knjigah o klinični laboratorijski diagnostiki.

Velika večina laboratorijev v zahodnih državah je opustila uporabo sulfosalicilne metode za določanje koncentracije beljakovin v urinu in za te namene aktivno uporablja pirogalolno metodo. Pirogalolna metoda za določanje koncentracije beljakovin v urinu in drugih bioloških tekočinah temelji na fotometričnem principu merjenja optične gostote obarvanega kompleksa, ki nastane pri interakciji beljakovinskih molekul z molekulami pirogalol rdeče-molibdatnega kompleksa.

Zakaj metoda s pirogalolom daje natančnejše rezultate za merjenje koncentracije beljakovin v urinu? Prvič, zaradi večje razredčitve vzorca urina v reakcijski mešanici. Če je pri sulfosalicilni metodi razmerje vzorec/reagent urina 1/3, se lahko pri pirogalolni metodi giblje od 1/12,5 do 1/60, odvisno od različice metode, kar bistveno zmanjša vpliv sestave urina na merilni rezultat. . Drugič, reakcija poteka v sukcinatnem pufru, to je pri stabilnem pH. In končno, sam princip metode je, lahko bi rekli, bolj »pregleden«. Natrijev molibdat in pirogalolno rdeče barvilo tvorita kompleks z beljakovinsko molekulo. To vodi do dejstva, da molekule barvila v prostem stanju ne absorbirajo svetlobe pri valovni dolžini 600 nm, ampak v kombinaciji z beljakovino absorbirajo svetlobo. Tako se zdi, da vsako beljakovinsko molekulo označimo z barvilom in posledično dobimo, da sprememba optične gostote reakcijske mešanice pri valovni dolžini 600 nm jasno korelira s koncentracijo beljakovin v urinu. Poleg tega, ker je afiniteta pirogalol rdečega za različne beljakovinske frakcije skoraj enaka, metoda omogoča določanje celotne beljakovine urina. Zato je meja normalnih vrednosti koncentracije beljakovin v urinu 0,1 g / l (navedena je v vseh sodobnih zahodnih priročnikih o klinični in laboratorijski diagnostiki, vključno s "Kliničnim vodnikom za laboratorijske teste", ki ga je uredil N. Tits ) . Primerjalne značilnosti pirogalolne in sulfosalicilne metode za določanje beljakovin v urinu so predstavljene v tabeli 1.

Za zaključek želim še enkrat poudariti dejstvo, da se ob prehodu laboratorija s sulfosalicilne metode za določanje beljakovin v urinu na pirogalolno metodo meja normalnih vrednosti bistveno poveča (z 0,03 g/l na 0,1 g/l). l!). Laboratorijsko osebje mora o tem obvestiti klinike, ker v trenutnih razmerah je diagnozo proteinurije mogoče postaviti le, če vsebnost beljakovin v urinu preseže 0,1 g/l.

Bibliografija.

1. Altshuler B.Yu., Rakov S.S., Tkachev G.A. // Vprašanje med. kemija. - 2001. - Št. 4. - Str.426-438.
2. Kim Yu.V., Potekhin O.E., Tokar M.I., Shibanov A.N. // Lab. med. - 2003. - Št. 6. - Str.94-98.
3. Klinični vodnik po laboratorijskih testih, ed. N. Titsa. - Unimed-press 2003. - 942 str.
4. Kozlov A.V., Slepysheva V.V. Metode za določanje beljakovin v urinu: možnosti in perspektive // ​​Zbirka del VII Letnik. SPb nefrol. seminar. - SPb: TNA. - 1999. - Str.17-28.
5. Pupkova V.I., Pikalov I.V., Khrykina E.N., Kharkovsky A.V. // Novice "Vector-Best". - 2003. - št. 4 (30).
6. Chambers R.E., Bullock D.G., Whicher J.T. //Ann. Clin. Biochem. - 1991. - Letn. 28 (Pt 5). - Str.467-473.
7. Klinična laboratorijska medicina. Ed. avtorja Kenneth D. McClatchey. - 2. izd.-2001.- 1993str.
8. Eppel G.A., Nagy S., Jenkins M.A., Tudball R.N., Daskalakis M., Balazs N.D.H., Comper W.D. // Clin. Biochem. - 2000. - letn. 33. - P.487-494.
9. Franke G., Salvati M., Sommer R.G. Sestavek in naprava za določanje beljakovin v urinu in metoda uporabe le-teh // US patent št. 5326707. - 1994.
10. Kaplan I.V., Levinson S.S. // Clin. Chem. - 1999. - Letn. 45. - Str.417-419.
11. Kashif W., Siddiqi N., Dincer H.E., Dincer A.P., Hirsch S. // Cleveland Clin. J. med. - 2003. - Letn. 70 (6). - Str.535-547.
12. Koerbin G, Taylor L, Dutton J, Marshall K, Low P, Potter JM. // Clin. Chem. - 2001. - letn. 47. - P.2183-2184.
13. Le Bricon T., Erlich D., Dussaucy M., Garnier J.P., Bousquet B. // Članek v francoščini. - Ann. Biol. Clin. (Pariz). - 1998. - Letn. 56(6). - Str.719-723.
14. Marshall T., Williams K.M. // Clin. Chem. - 2003. - Letn. 49 (12). - Str.2111-2112.
15. Pugia M., Newman DJ, Lott J.A., D'Mello L., Clark L., Profitt J.A., Cast T. // Clin. Chim. Acta. - 2002. - letn. 326 (1-2). - Str.177-183.
16. Ringsrud K.M., Linne J.J. Analiza urina in telesnih tekočin: barvno besedilo in atlas // Mosby. - 1995. - Str.52-54.
17. Shepard M.D., Penberthy L.A. // Clin. Chem. - 1987. - Letn. 33. - Str.792-795.
18. Williams K.M., Marshall T. // J. Biochem. Biophys. Metode. - 2001. - letn. 47. - Str.197-207.
19. Williams K.M., Arthur S.J., Burrell G., Kelly F., Phillips D.W., Marshall T. // J. Biochem. Biophys. Metode. - 2003. - Letn. 57(1). - Str.45-55.