• Proteine ​​nelle urine, test di laboratorio. Determinazione qualitativa delle proteine ​​nelle urine

    30.07.2019

    La proteinuria è la comparsa di proteine ​​nelle urine in concentrazioni che consentono di rilevarla utilizzando metodi qualitativi.

    Distinguere

    • Proteinuria renale e
    • Proteinuria extrarenale (postrenale).

    Proteinuria renale

    La proteinuria renale è causata dal danno al filtro glomerulare o dalla disfunzione dell'epitelio del tubulo contorto.

    Esistono proteinuria selettiva e non selettiva a seconda del rapporto tra alcune proteine ​​plasmatiche e urinarie, del loro peso molecolare e della loro carica.

    Proteinuria selettiva

    La proteinuria selettiva si verifica con un'interruzione minima (spesso reversibile) del filtro glomerulare ed è rappresentata da proteine ​​a basso peso molecolare (peso molecolare non superiore a 68.000) - albumina, ceruloplasmina, transferrina.

    Proteinuria non selettiva

    La proteinuria non selettiva è più comune nei casi di danno del filtro più grave, quando le proteine ​​molecolari di grandi dimensioni iniziano ad essere perse. La selettività della proteinuria è un importante segno diagnostico e prognostico.

    La proteinuria renale può essere:

    • biologico e
    • funzionale (fisiologico).

    Proteinuria renale organica

    La proteinuria renale organica si verifica quando è presente un danno organico al nefrone. A seconda del meccanismo predominante di insorgenza, si possono distinguere alcuni tipi di proteinuria organica.

    Proteinuria glomerulare

    Proteinuria glomerulare - causata da un danno al filtro glomerulare, si verifica con glomerulonefrite e nefropatie associate a malattie metaboliche o vascolari. (glomerulonefrite, ipertensione, fattori infettivi e allergici, scompenso cardiaco)

    Proteinuria tubulare

    La proteinuria tubulare è associata all'incapacità dei tubuli di riassorbire le proteine ​​plasmatiche a basso peso molecolare che sono passate attraverso il filtro glomerulare inalterato. (amiloidosi, necrosi tubulare acuta, nefrite interstiziale, sindrome di Fanconi)

    Proteinuria prerenale

    Proteinuria prerenale (eccessiva) - si sviluppa in presenza di una concentrazione plasmatica insolitamente elevata di proteine ​​a basso peso molecolare, che viene filtrata dai glomeruli normali in una quantità superiore alla capacità fisiologica dei tubuli di riassorbimento. (mieloma, necrosi muscolare, emolisi eritrocitaria)

    Proteinuria renale funzionale

    La proteinuria renale funzionale non è associata a malattia renale e non richiede trattamento.

    La proteinuria funzionale comprende:

    • in marcia,
    • emotivo,
    • Freddo,
    • intossicazione,
    • ortostatico (solo nei bambini e solo in posizione eretta).

    Proteinuria extrarenale (postrenale).

    Con la proteinuria extrarenale (postrenale), le proteine ​​possono entrare nelle urine dalle vie urinarie e genitali (con colpite e vaginite - con urina raccolta in modo improprio). IN in questo caso questo non è altro che una miscela di essudato infiammatorio.

    La proteinuria extrarenale, di regola, non supera 1 g/die ed è spesso transitoria.

    La diagnosi di proteinuria extrarenale è facilitata dal test dei tre bicchieri e dall'esame urologico.

    La proteinuria postrenale si verifica con cistite e uretrite.

    Metodi per la determinazione delle proteine ​​nelle urine

    Una condizione necessaria Quando si eseguono test per la presenza di proteine, l'urina è assolutamente trasparente.

    Campioni qualitativi

    Prova con acido solfosalicilico

    3-4 ml di urina filtrata vengono versati in due provette. Aggiungere 6-8 gocce di una soluzione al 20% di acido solfosalicilico nella provetta. Il secondo tubo è il controllo. Su uno sfondo scuro, confrontare la provetta di controllo con quella sperimentale. Se nei campioni di urina sono presenti proteine, appare una torbidità opalescente.

    Il risultato è indicato come segue:

    • reazione debolmente positiva (+),
    • positivo (++),
    • nettamente positivo (+++).

    Il campione è altamente sensibile.

    È anche possibile utilizzare un campione secco, aggiungendo diversi cristalli di acido solfosalicilico o carta da filtro pre-impregnata con una soluzione di questo acido a diversi millilitri di urina.

    Falsi positivi può essere causata dall'assunzione di preparati di iodio, sulfamidici, grandi dosi di penicillina e dalla presenza di acido urico in alte concentrazioni nelle urine.

    Test dell'acido nitrico (test di Geller)

    1–2 ml di una soluzione di acido nitrico al 50% vengono versati in una provetta, quindi una uguale quantità di urina viene stratificata sull'acido. Quando sono presenti proteine, appare un anello bianco all'interfaccia di due liquidi. A volte si forma un anello rossastro leggermente al di sopra del confine tra i liquidi. viola dalla presenza di urati. L'anello dell'urato, a differenza dell'anello proteico, si dissolve con un leggero riscaldamento.

    Campione brillante

    Il test Bright bollire e i test di screening della proteinuria (campioni colorimetrici secchi) non richiedono praticamente alcun reagente.

    Quando l'urina contenente proteine ​​viene bollita, si denatura, formando un precipitato simile a una nuvola o scaglie che non sono solubili in acido acetico al 6%, a differenza dei sali fosfato. I test di screening si basano sulla capacità di una proteina (albumina) di modificare il colore della carta rivestita con un indicatore (solitamente blu di bromofenolo) e un tampone. La relazione diretta tra l'intensità del colore della carta indicatrice (Albufan, Albutest - Repubblica Ceca; Labstix, Multistix - USA; Comburtest - Germania) e la quantità di proteine ​​ci consente di stimare approssimativamente la quantità di proteinuria. Tuttavia, i test di screening attualmente utilizzati non sono privi di inconvenienti. In particolare, il blu di bromofenolo non rileva la proteina di Bence Jones.

    Metodi quantitativi

    Metodo Brandberg-Roberts-Stolnikov

    Il metodo si basa su un campione qualitativo con acido nitrico. La procedura di prova è descritta sopra. La comparsa di un sottile anello al confine dei due liquidi tra il 2° e il 3° minuto dopo la stratificazione indica la presenza di 0,033 g/l di proteine ​​nelle urine (la concentrazione di proteine ​​nelle urine è solitamente espressa in ppm, cioè grammi per litro). Se l'anello appare prima di 2 minuti, l'urina deve essere diluita con acqua. Selezionare una diluizione dell'urina tale che, quando viene stratificata sull'acido nitrico, appaia un anello nel 2-3° minuto. Il grado di diluizione dipende dalla larghezza e dalla compattezza dell'anello e dal tempo della sua comparsa.

    La concentrazione proteica viene calcolata moltiplicando 0,033 g/l per il grado di diluizione delle urine (Tabella 8).

    Il metodo di diluizione di Roberts-Stolnikov presenta una serie di svantaggi: è soggettivo, richiede molto lavoro e l'accuratezza della determinazione della concentrazione proteica diminuisce man mano che l'urina viene diluita.

    I metodi più convenienti e accurati sono il metodo nefelometrico e quello del biureto.

    Metodo nefelometrico

    Basato sulla proprietà delle proteine ​​di produrre torbidità con acido solfosalicilico, la cui intensità è proporzionale alla concentrazione delle proteine. 1,25 ml di urina filtrata vengono versati in una provetta graduata e ad un volume di 5 ml viene aggiunta una soluzione al 3% di acido solfosalicilico, agitando accuratamente. Dopo 5 minuti, l'estinzione viene misurata su FEK-M (o qualsiasi altro fotometro) a una lunghezza d'onda di 590–650 nm (filtro arancione o rosso) rispetto al controllo in una cuvetta con uno spessore dello strato di 0,5 cm. Per il controllo, 1,25 ml si utilizza urina filtrata (la stessa), alla quale si aggiunge una soluzione isotonica di cloruro di sodio per un volume di 5 ml.

    Per prima cosa viene costruita una curva di calibrazione della dipendenza del valore di estinzione dalla concentrazione proteica. Per preparare varie concentrazioni proteiche, viene utilizzata una soluzione standard di albumina (da siero umano o bovino). Compila il foglio di lavoro.

    Metodo del biureto

    Si basa sulla capacità delle proteine ​​di produrre, con solfato di rame e alcali caustici, un complesso biureto di colore viola, la cui intensità di colore è direttamente proporzionale alla quantità di proteine. A 2 ml di urina aggiungere 2 ml di soluzione di acido tricloroacetico per far precipitare le proteine ​​e centrifugare. Il liquido surnatante viene travasato. Al precipitato (proteina) vengono aggiunti 4 ml di una soluzione di NaOH al 3% e 0,1 ml di una soluzione di solfato di rame al 20% (proteina), agitati e centrifugati. Il liquido surnatante viola viene fotomisurato ad una lunghezza d'onda di 540 nm (filtro verde) contro acqua distillata in una cuvetta con uno spessore di strato di 1,0 cm. La concentrazione proteica viene determinata da una tabella ottenuta sperimentalmente (una curva di calibrazione è costruita come nella precedente metodo).

    Prova ortostatica

    Indicato per sospetta proteinuria ortostatica e nefroptosi. Dopo lo svuotamento completo Vescia Il soggetto mantiene una posizione orizzontale per 2 ore. Quindi, senza alzarsi, somministra una porzione (di controllo) di urina. Nelle 2 ore successive il soggetto cammina continuamente, mantenendo la posizione di massima lordosi lombare (tenendo un bastone dietro la parte bassa della schiena), dopodiché somministra una seconda porzione di urina. In entrambe le porzioni di urina vengono determinati la concentrazione proteica e il contenuto proteico in grammi e, in caso di nefroptosi, viene determinato il numero di globuli rossi in 1 ml. Con la proteinuria ortostatica, nella seconda porzione si rileva proteinuria o un aumento del contenuto proteico iniziale in grammi. La comparsa di ematuria, spesso in combinazione con tracce di proteinuria nella seconda porzione, è caratteristica della nefroptosi.

    Determinazione delle uroproteine ​​di Bence Jones

    Le proteine ​​di Bence Jones sono paraproteine ​​a basso peso molecolare termolabili (peso molecolare relativo compreso tra 20.000 e 45.000) riscontrate principalmente nel mieloma multiplo e nella macroglobulinemia di Waldenström. Sono catene leggere di immunoglobuline. Grazie al loro basso peso molecolare, le catene L passano facilmente dal sangue attraverso un filtro renale intatto nelle urine e possono essere rilevate lì mediante una reazione di termoprecipitazione. Si consiglia di effettuare lo studio solo se il test con acido solfosalicilico risulta positivo. La determinazione viene effettuata come segue. A 10 ml di urina aggiungere 3-4 gocce di una soluzione di acido acetico al 10% e 2 ml di una soluzione satura di cloruro di sodio, scaldare accuratamente a bagnomaria, aumentando gradualmente la temperatura. Se sono presenti proteine ​​​​di Bence Jones nelle urine, a una temperatura di 45-60 ° C appare una torbidità diffusa o si forma un denso precipitato bianco. Dopo ulteriore riscaldamento fino all'ebollizione, il precipitato si dissolve e dopo il raffreddamento ricompare. Questo test non è abbastanza sensibile e deve essere testato mediante elettroforesi e immunoelettroforesi.

    Molte malattie si verificano senza pronunciarsi manifestazioni cliniche, pertanto, determinazione delle proteine ​​nelle urine ai fini della rilevazione e del trattamento tempestivi condizione patologicaÈ punto importante per la medicina pratica.

    Le proteine ​​nelle urine possono essere determinate con metodi qualitativi e quantitativi.

    Metodi qualitativi


    Al momento se ne conoscono circa 100 reazioni qualitative per le proteine. Implicano la precipitazione delle proteine ​​mediante azione fisica o chimica. Con una reazione positiva, si verifica la nuvolosità.

    I test più informativi sono:

    • Con acido solfosalicilico. È considerato il più sensibile e con il suo aiuto è possibile determinare anche la più piccola quantità di corpi proteici nelle urine. La descrizione del risultato con una traccia di presenza di proteine ​​è indicata con il termine "opalescenza", mentre con una quantità maggiore - "debolmente positivo", "positivo" e con una grande perdita di proteine ​​nelle urine - "reazione fortemente positiva". .
    • Con un sostituto acido - aseptolo. Una soluzione della sostanza viene aggiunta all'urina e quando si forma un anello al confine delle soluzioni, il campione viene detto positivo.
    • Geller. Prodotto utilizzando una soluzione di acido nitrico. Il risultato della procedura viene interpretato in modo simile a quello con Aseptol. A volte può essere presente un anello quando l'urato è presente nel liquido di prova.
    • Con acido acetico con aggiunta di anidride solforosa di potassio. Se durante l'esecuzione di tale test la concentrazione di urina è elevata, viene diluita, altrimenti potrebbe verificarsi un risultato falso positivo, poiché la reazione sarà agli urati e all'acido urico.

    L'esecuzione impropria di tale test può spesso dare un risultato errato nei neonati, poiché la loro urina si forma con un alto contenuto di acido urico.


    Le regole di base per l'esecuzione dei test sono le seguenti: è necessario che l'urina da testare sia trasparente, abbia un ambiente leggermente acido (per questo a volte viene aggiunta una piccola quantità di acido acetico), devono esserci due provette per monitoraggio.

    quantificazione


    Quando viene eseguito un test delle urine, anche le proteine ​​totali vengono determinate utilizzando metodi quantitativi. Ce ne sono parecchi, ma i più comunemente usati sono i seguenti:
    • Metodo Esbach. Utilizzato dal 19° secolo. Per fare ciò, l'urina e il reagente vengono versati in una determinata provetta. Poi si agita leggermente il composto e si lascia coperto per 24-48 ore. Il precipitato risultante viene contato per divisione sulla provetta. La conclusione corretta può essere tratta solo con l'urina acida. Questa tecnica è abbastanza semplice, ma non ha un'elevata precisione e richiede molto tempo.
    • Metodo Brandberg-Stolnikov. Basato sul test Heller, che consente di ottenere un risultato con una concentrazione proteica superiore a 3,3 mg%. Successivamente questo metodo è stato modificato e semplificato.
    • I metodi nefelometrici per determinare la quantità di proteine ​​sono ampiamente utilizzati.
    Per comprendere appieno la quantità di proteine, è meglio utilizzare un test delle urine per le proteine ​​giornaliere.
    • Per risultato corretto si versa la prima porzione mattutina, la raccolta inizia con la seconda porzione in un contenitore, che si consiglia di conservare in frigorifero.
    L'ultima porzione viene raccolta al mattino. Successivamente, è necessario misurare il volume, quindi mescolare accuratamente e versare una porzione non superiore a 50 ml in un barattolo. Questo contenitore deve essere inviato al laboratorio. Un modulo speciale richiede di indicare i risultati del volume totale di urina giornaliera, nonché l’altezza e il peso del paziente.

    Utilizzo delle strisce reattive


    Il test delle proteine ​​urinarie funziona secondo il principio degli indicatori. Le strisce speciali possono cambiare colore a seconda della concentrazione proteica. Sono convenienti per determinare i cambiamenti che si verificano in momenti diversi e vengono utilizzati sia a casa che in qualsiasi istituto medico e preventivo

    Le strisce reattive per le urine vengono utilizzate secondo necessità definizione precoce e monitorare i risultati del trattamento per le patologie genito-urinarie. Questa tecnica diagnostica è sensibile e reagisce all'albumina nella sua concentrazione di 0,1 g/l e consente di determinare cambiamenti qualitativi e semiquantitativi nel contenuto proteico nelle urine.

    Sulla base dei risultati di questa diagnosi, è possibile monitorare l'efficacia della terapia, apportarvi modifiche e prescrivere la dieta necessaria.

    Tutti i metodi per determinare le proteine ​​nelle urine si basano sulla coagulazione delle proteine ​​sotto l'influenza di agenti chimici o termici. Se sono presenti proteine ​​​​nelle urine, appare torbidità, il cui grado dipende dalla quantità di proteine.

    A) campioni di qualità la determinazione delle proteine ​​nelle urine è obbligatoria.

    1. Test con acido nitrico– aggiungere con cautela in una provetta una pari quantità di urina con 1-2 ml di soluzione di acido nitrico al 50%, cercando di non agitare il liquido. Se nelle urine sono presenti proteine, al confine dei due liquidi appare un anello bianco, meglio visibile su sfondo nero.

    2. Test con acido solfasalicilico– Si versano 4-5 ml di urina in una provetta e si aggiungono 8-10 gocce del reagente. Se sono presenti proteine ​​nelle urine, a seconda della loro quantità, si può verificare intorbidimento o flocculazione.

    3. Test rapido (campione diagnostico secco)– una striscia di cartina indicatrice Albufan viene immersa nell'urina da analizzare in modo da bagnare contemporaneamente entrambe le zone indicatrici (la zona superiore serve per la determinazione del pH, la zona inferiore per la determinazione delle proteine). Dopo 2-3 secondi, la striscia viene posizionata su una lastra di vetro bianco. La valutazione viene effettuata 60 secondi dopo aver bagnato la striscia con l'urina, utilizzando la scala cromatica stampata sull'astuccio con strisce indicatrici.

    B) campioni quantitativi– effettuato in quelle porzioni di urina in cui è stata rilevata la proteina durante la sua determinazione qualitativa; la determinazione viene effettuata nello strato surnatante dopo la centrifugazione

    Metodo Brandberg-Roberts-Stolnikov– Si versano in una provetta 1-3 ml di soluzione di acido nitrico al 50% e si stratifica accuratamente lungo la parete la stessa quantità di urina. Il tempo viene registrato su un cronometro. Se si forma un anello al confine dei liquidi immediatamente o prima di 2 minuti dopo la stratificazione, l'urina deve essere diluita con acqua. Successivamente, le proteine ​​vengono nuovamente determinate nell'urina diluita. La diluizione viene effettuata fino alla comparsa di un anello bianco tra il 2° e il 3° minuto quando l'urina diluita viene applicata all'acido nitrico. La quantità di proteine ​​viene determinata moltiplicando 0,033 ppm per il tasso di diluizione.

    18. Tecnica per prelevare strisci per flora, gonococchi, trichomonas, esame citologico, KPI.

    Tecnica per prelevare strisci di flora: il materiale viene prelevato dal canale cervicale e dall'uretra con apposito spazzolino sotto controllo visivo. Il campione risultante viene immediatamente posto su un vetrino e macinato.

    Tecnica per prelevare strisci per Trichomonas: in primo luogo, il materiale viene prelevato raschiando dalla mucosa dell'uretra (dopo un massaggio preliminare per 1 minuto sulla sinfisi pubica) e dal fornice posteriore della vagina, quindi la parte vaginale della cervice viene pulita con un tampone sterile tampone inumidito con soluzione salina, il tappo mucoso viene rimosso e canale cervicale inserire con attenzione una sonda a una profondità non superiore a 1,0-1,5 cm e raschiare la mucosa della cervice.

    Tecnica per prelevare strisci per gonococchi: il materiale viene prelevato dall'uretra, dalle ghiandole di Bartolini e dai dotti parauretrali dopo averli puliti con un batuffolo di cotone imbevuto di soluzione salina, una pinzetta vaginale o un'apposita sonda. Il materiale viene prelevato dal retto con un cucchiaio smussato. In caso di gonorrea cronica e torpida, prima dello studio viene effettuata una provocazione per aumentare la probabilità di identificare l'agente patogeno.

    Non puoi prendere il materiale con un batuffolo di cotone durante le mestruazioni.

    Tecnica per il prelievo di strisci per l'esame citologico: si preleva uno striscio dalla superficie dell'esocervice, della vagina e della vulva utilizzando una spatola, dall'endocervice utilizzando un endo-spazzolino. Il materiale viene applicato in uno strato sottile su vetro sgrassato appositamente trattato e trattato con una composizione speciale per evitare che le cellule si secchino. I preparati vengono colorati con il metodo Papanicolaou (il cosiddetto PAP test) ed esaminati al microscopio.

    Indice cariopicnotico– percentuale di cellule superficiali con nuclei picnotici rispetto a cellule con nuclei vescicolari (non picnotici). CPI all'inizio della fase follicolare ciclo mestruale 25-30%, al momento dell'ovulazione 60-70%, nella fase luteale diminuisce al 25%.

    L'urina è un fluido biologico importante nel corpo umano. Con esso vengono rimossi la maggior parte dei prodotti metabolici. In una persona sana, la sua composizione ha valori relativamente fissi. Quando si verifica una malattia, alcuni indicatori cambiano, il che consente ai medici curanti di chiarire la diagnosi. L'analisi delle proteine ​​nelle urine delle 24 ore aiuterà a identificare i problemi nella funzionalità renale.

    Analisi delle urine giornaliere o diuresi giornaliera

    Questo è un test di laboratorio che determina la quantità di fluido rilasciato al giorno. Questo metodo viene utilizzato per valutare lo stato della funzionalità renale. Composizione dell'urina:

    Ogni componente dovrebbe normalmente contenere una certa quantità, la deviazione dalla quale è considerata una patologia. Quando si studia l'assunzione giornaliera di proteine, la norma per uomini e donne adulti è la stessa. Durante la normale funzione renale, questa sostanza non deve entrare nelle urine o può contenere una piccola quantità di 40-80 mg. Una scarica di 150 mg o più è considerata patologica. Tuttavia, con l'età, soprattutto dopo i 60 anni, è consentito un leggero eccesso. indicatore accettabile, e questo è collegato a cambiamenti legati all’età nell'organismo. In alcuni casi, il rilevamento delle proteine ​​è spiegato da una preparazione inadeguata prima della raccolta del biomateriale o da errori nella nutrizione. Nei bambini, la norma dipende dall'età, dal peso e dalla superficie corporea.

    informazioni generali

    Sulla base dei risultati dei test di laboratorio sulle urine giornaliere, si ottengono le seguenti informazioni:

    • Il volume di liquidi che viene rilasciato dal corpo durante il giorno. In media è di 1750 ml e può oscillare sia verso il basso che verso l'alto a seconda del volume del liquido bevuto.
    • Zucchero. Questo indicatore è particolarmente importante per i pazienti affetti da diabete.
    • Ossalati. Il superamento dei limiti consentiti è irto della formazione di sabbia e calcoli nei reni.
    • Metanefrina. Questa sostanza si forma dopo la scomposizione degli ormoni. Le deviazioni dalla norma nella direzione dell'aumento sono un segno di patologia renale, del sistema cardiovascolare e così via.
    • Proteina. Nelle persone sane, questo indicatore non dovrebbe essere osservato nelle urine. Questo è uno dei parametri importanti che viene rilevato durante l'analisi quotidiana delle urine. Un livello elevato indica segni di patologie renali e malattie del sistema nervoso centrale. Oltre alla quantità totale di proteine, i test di laboratorio sul fluido biologico possono rilevare anche i composti proteici, anch'essi importanti per una diagnosi corretta.

    Indicazioni per la prescrizione del test delle proteine ​​nelle urine delle 24 ore

    A causa del fatto che i cambiamenti nella composizione qualitativa e quantitativa delle urine iniziano prima dei sintomi della malattia, l'analisi consente il rilevamento tempestivo della patologia. Indicazioni per questo tipo di ricerca negli adulti e nei bambini sono la presenza delle seguenti malattie:

    • amiloidosi (disturbo del metabolismo delle proteine);
    • diabete mellito;
    • nefropatia, che si manifesta come gonfiore delle gambe;
    • ischemia cardiaca;
    • insufficienza renale.

    Inoltre, viene prescritto quando il paziente assume determinati farmaci: aminoglicosidi, ACE inibitori, diuretici tiazidici e alcuni altri farmaci.

    Fase preparatoria

    Per essere più informativi e ottenere le informazioni più obiettive in base ai risultati dell'analisi delle proteine ​​nelle urine giornaliere, è necessario seguire alcune regole obbligatorie e sono le seguenti:

    • Per un giorno o più, eliminare l'uso di complessi vitaminici, anticoagulanti e diuretici.
    • Cambia la tua dieta il giorno prima. Evita cibi piccanti, grassi e dolci, nonché bevande alcoliche e caffè.
    • Non donare biomateriale durante le mestruazioni.
    • Per raccogliere l'urina, acquista un contenitore speciale in farmacia oppure puoi usarlo tu stesso barattolo di vetro, con un volume di almeno tre litri.

    per l'analisi delle proteine?

    Le regole per la raccolta del biomateriale sono generali sia per uomini e donne adulti che per bambini che hanno raggiunto una certa età e possono utilizzare il vasino in autonomia.

    1. Immediatamente prima della raccolta dell'urina è necessario lavare i genitali esterni.
    2. La prima porzione di biomateriale non viene presa in considerazione. Tuttavia, viene registrata l'ora della minzione mattutina.
    3. Raccogliere tutto il fluido secreto per 24 ore. La raccolta delle urine continua anche di notte.
    4. Si consiglia di conservare i contenitori con biomateriale a una temperatura non superiore a 8 gradi e non inferiore a 5.
    5. Immediatamente dopo aver raccolto l'ultima porzione, l'urina raccolta deve essere accuratamente miscelata.
    6. Dovresti prima chiedere al tuo medico come sottoporre al laboratorio un test delle urine giornaliero per le proteine. Ci sono due modi. Circa 100 ml di biomateriale vengono versati in un contenitore taglia piccola e portato al laboratorio oppure l'intero volume giornaliero può essere consegnato in un grande contenitore.
    7. Nei casi in cui le variazioni giornaliere della diuresi sono importanti, il medico consiglia di registrare il volume di eventuali liquidi consumati nell'arco di 24 ore.

    Come raccogliere un test giornaliero delle urine per le proteine ​​per i bambini di età inferiore a un anno? Questa domanda interessa le giovani madri. Quando prescrivono tale studio ai bambini, i pediatri consigliano di acquistare un dispositivo speciale per la raccolta di biomateriale, che viene venduto liberamente nelle farmacie. Non dovresti spremere liquidi dai pannolini o cogliere il momento in cui il tuo bambino vuole urinare.

    Proteinuria o proteine ​​nelle urine delle 24 ore

    Questo termine si riferisce ad alti livelli di sostanze proteiche nelle urine. Viene utilizzato per monitorare la funzionalità renale. Esistono i seguenti tipi di proteinuria. Lieve: non è foriero di malattia e si verifica per ragioni naturali. Moderato e grave: questi tipi indicano problemi nel funzionamento dei reni. In questi casi, oltre alle proteine ​​nell’esame delle urine delle 24 ore, si riscontrano sintomi quali:

    • dolore osseo;
    • vertigini;
    • perdita di appetito;
    • sonnolenza;
    • nausea;
    • vomito;
    • grave affaticamento.

    Ragioni per la comparsa di proteine ​​nelle urine:

    • insufficienza cardiaca;
    • malattie del sistema nervoso centrale;
    • ipertiroidismo;
    • endocardite infettiva.

    Un cambiamento nella composizione dell'urina è indicato dalla sua tonalità; la comparsa di un colore biancastro è segno della presenza di albumina, una sostanza proteica.

    Tipi di proteinuria

    Il fattore principale che influenza la comparsa dei composti proteici nelle urine sono i problemi nell'assorbimento di questa sostanza. La proteinuria si distingue:

    • Canalicolare. In alcune malattie, l’assorbimento delle proteine ​​è impossibile o difficile.
    • Glomerulare. In questo caso, le molecole proteiche non vengono trattenute e vengono escrete insieme al liquido. Questo fenomeno è tipico delle seguenti patologie: pielonefrite, danno renale da tossine, glomerulonefrite.
    • Extrarenale. Danni presenti tratto urinario, caratteristico di uretrite, colpite e cistite.

    Per determinare il tipo di proteinuria, viene utilizzato l'esame microscopico. Inoltre, se necessario, il medico prescrive altri tipi di esami, tra cui ultrasuoni, risonanza magnetica e altri metodi hardware.

    Proteine ​​nelle urine durante la gravidanza. Cause

    Le proteine ​​sono un materiale da costruzione che prende parte a vari processi nel corpo dell’individuo. La sua rilevazione nelle urine è considerata un segno dello sviluppo di processi patologici. I globuli renali perdono la loro integrità e le proteine ​​entrano nelle urine insieme a sostanze nocive, e la causa di questo fallimento è il processo infiammatorio nei reni. L'analisi delle urine consente di riconoscere tempestivamente la malattia e verificarla operazione appropriata reni durante il periodo più responsabile e importante nella vita di una donna. Qualsiasi, anche il minimo rilevamento di proteine ​​​​nelle donne in gravidanza in un test delle urine quotidiano è un segno dell'inizio dello sviluppo della patologia. Le cause del suo aspetto sono le seguenti malattie:

    • glomerulonefrite;
    • lupus eritematoso;
    • nefrite;
    • ipertensione;
    • diabete mellito.

    Così come i processi infettivi e infiammatori nei reni, le loro lesioni di natura meccanica, ustioni, ipotermia, avvelenamento con sostanze tossiche o trattamento di neoplasie maligne con farmaci chemioterapici prima della gravidanza.

    Gravidanza sicura

    Per diagnosticare le malattie renali, viene utilizzato un metodo semplice: un test delle urine quotidiano per le proteine. Rispetto delle condizioni per raccolta corretta l'urina è un must per ogni donna incinta.

    1. I genitali esterni devono essere puliti. Puoi lavarti usando il sapone normale. È vietato l'uso di antisettici o preparati erboristici poiché distorcerebbero l'affidabilità dei risultati.
    2. Raccogliere l'urina in un contenitore pulito e asciutto con collo largo.

    Se vengono rilevate proteine ​​​​nelle urine, il medico prescrive un trattamento che proteggerà il feto dagli effetti negativi della malattia che causa la comparsa di sostanze proteiche nelle urine. Successivamente, è necessario scoprire la ragione di questo fenomeno. Nella maggior parte dei casi, si trova nella rottura dei reni. La comparsa di proteine ​​​​nel biomateriale nella seconda metà della gravidanza è uno dei sintomi della gestosi. Quindi si verificano gonfiore e cambiamenti nella pressione sanguigna.

    • test delle urine giornaliero per le proteine;
    • visite regolari dal medico;
    • controllo della pressione;
    • nutrizione arricchita con complessi vitaminici;
    • assunzione moderata di liquidi;
    • evitando le spezie e, se possibile, il sale o riducendone al minimo la quantità.

    A scopo preventivo, nonché per ridurre i composti proteici nelle urine, il medico può prescrivere medicinali a base di erbe o decotti alle erbe che hanno un effetto diuretico.

    Trattamento e prevenzione

    Dovresti affidare l'interpretazione dei test al tuo medico. Se rilevato ragioni patologiche comparsa di sostanze proteiche nelle urine, viene prescritta solo la terapia necessaria operatore sanitario. Non è consigliabile automedicare e lasciarsi trasportare metodi non convenzionali. Quando si identificano cause non correlate a processi patologici, prestare attenzione Attenzione speciale dieta. È importante ricordare che l'efficacia della terapia dipende dalla diagnosi tempestiva.

    26.02.2009

    Kurilyak OA, Ph.D.

    Normalmente, le proteine ​​vengono escrete nelle urine in modo relativamente piccola quantità, solitamente non più di 100-150 mg/giorno.

    La diuresi giornaliera in una persona sana è di 1000-1500 ml/giorno; pertanto, la concentrazione proteica in condizioni fisiologiche è pari a 8-10 mg/dL (0,08-0,1 g/L).

    Le proteine ​​totali dell'urina sono rappresentate da tre frazioni principali: albumina, mucoproteine ​​e globuline.

    L'albumina urinaria è quella porzione di albumina sierica che è stata filtrata nei glomeruli e non è stata riassorbita nei tubuli renali; La normale escrezione di albumina nelle urine è inferiore a 30 mg/die. L'altra principale fonte di proteine ​​nelle urine sono i tubuli renali, in particolare la parte distale dei tubuli. Questi tubuli secernono due terzi della quantità totale di proteine ​​urinarie; di questa quantità, circa il 50% è rappresentato dalla glicoproteina Tamm-Horsfall, che è secreta dall'epitelio dei tubuli distali e svolge un ruolo importante nella formazione dei calcoli urinari. Altre proteine ​​sono presenti nelle urine una piccola quantità e provengono da proteine ​​plasmatiche a basso peso molecolare filtrate a livello renale che non vengono riassorbite dai tubuli renali, microglobuline dall'epitelio tubulare renale (RTE) e secrezioni prostatiche e vaginali.

    La proteinuria, cioè l'aumento delle proteine ​​nelle urine, è uno dei sintomi più significativi che riflettono il danno renale. Tuttavia, anche una serie di altre condizioni possono essere accompagnate dalla proteinuria. Pertanto, esistono due gruppi principali di proteinuria: proteinuria renale (vera) ed extrarenale (falsa).

    Nella proteinuria renale, le proteine ​​entrano nelle urine direttamente dal sangue a causa dell'aumentata permeabilità del filtro glomerulare. La proteinuria renale si verifica spesso con glomerulonefrite, nefrosi, pielonefrite, nefrosclerosi, amiloidosi renale, varie forme nefropatie, ad esempio nefropatia della gravidanza, stati febbrili, ipertensione, ecc. La proteinuria può essere rilevata anche in persone sane dopo uno sforzo fisico intenso, ipotermia e stress psicologico. Nei neonati, nelle prime settimane di vita si osserva una proteinuria fisiologica e con l'astenia nei bambini e negli adolescenti in combinazione con una rapida crescita all'età di 7-18 anni è possibile una proteinuria ortostatica (in posizione eretta del corpo).

    In caso di falsa proteinuria (extrarenale), la fonte di proteine ​​nelle urine è una miscela di leucociti, eritrociti e cellule epiteliali tratto urinario urotelio. La decomposizione di questi elementi, particolarmente pronunciata nella reazione alcalina dell'urina, porta al rilascio di proteine ​​nell'urina che ha già superato il filtro renale. Particolarmente alto grado la falsa proteinuria provoca una mescolanza di sangue nelle urine; in caso di ematuria abbondante, può raggiungere 30 g/l o più. Malattie che possono essere accompagnate proteinuria extrarenale- urolitiasi, tubercolosi renale, tumori del rene o del tratto urinario, cistite, pielite, prostatite, uretrite, vulvovaginite.

    La classificazione clinica comprende proteinuria lieve (meno di 0,5 g/die), moderata (da 0,5 a 4 g/die) o grave (più di 4 g/die).

    La maggior parte dei pazienti con malattie renali, come la glomerulonefrite acuta o la pielonefrite, presentano una proteinuria moderata, ma i pazienti con sindrome nefrosica in genere espellono più di 4 g di proteine ​​nelle urine al giorno.

    Per la determinazione quantitativa delle proteine ​​viene utilizzata un'ampia gamma di metodi, in particolare il metodo unificato Brandberg-Roberts-Stolnikov, il metodo del biureto, il metodo che utilizza l'acido solfosalicilico, i metodi che utilizzano il colorante blu di Coomassie, il colorante rosso pirogallolo, ecc.

    L'uso di vari metodi per la determinazione delle proteine ​​nelle urine ha portato ad una grave confusione nell'interpretazione dei limiti normali per il contenuto proteico nelle urine. Poiché nei laboratori vengono spesso utilizzati due metodi: con acido solfosalicilico e colorante rosso pirogallolo, considereremo il problema della correttezza dei limiti delle norme appositamente per loro. Dal punto di vista del metodo al solfosalicilico, nelle urine normali il contenuto proteico non deve superare 0,03 g/l, dal punto di vista del metodo al pirogallolo - 0,1 g/l! Le differenze sono triplici!!!

    Bassi valori della normale concentrazione di proteine ​​nelle urine quando si utilizza l'acido solfosalicilico sono dovuti ai seguenti punti:

    • La curva di calibrazione viene costruita utilizzando una soluzione acquosa di albumina. La composizione dell’urina è molto diversa da quella dell’acqua: pH, sali, composti a basso peso molecolare (creatinina, urea, ecc.). Di conseguenza, secondo Altshuler, Rakov e Tkachev, l'errore nella determinazione delle proteine ​​​​nelle urine può essere 3 volte o più! Quelli. risultati di determinazione corretti possono essere ottenuti solo nei casi in cui l'urina ha un valore molto basso peso specifico e nella sua composizione e pH è vicino all'acqua;
    • maggiore sensibilità del metodo sulfosalicilico all'albumina rispetto ad altre proteine ​​(mentre, come accennato in precedenza, l'albumina nei campioni di urina normali non costituisce più del 30% delle proteine ​​totali dell'urina);
    • se il pH delle urine viene spostato verso il lato alcalino, si verifica la neutralizzazione dell'acido solfosalicilico, che provoca anche una sottostima dei risultati della determinazione delle proteine;
    • la velocità di sedimentazione dei precipitati è soggetta a variazioni significative: a basse concentrazioni proteiche, la precipitazione viene rallentata e l'arresto anticipato della reazione porta a una sottostima del risultato;
    • la velocità della reazione di precipitazione dipende in modo significativo dall'agitazione della miscela di reazione. A concentrazioni elevate di proteine, l'agitazione vigorosa della provetta può portare alla formazione di grandi fiocchi e alla loro rapida sedimentazione.

    Tutte le caratteristiche del metodo sopra elencate portano ad una significativa sottostima della concentrazione proteica determinata nelle urine. Tuttavia, il grado di sottostima dipende fortemente dalla composizione di un particolare campione di urina. Poiché il metodo dell'acido solfosalicilico fornisce valori sottostimati della concentrazione proteica, anche il limite normale per questo metodo di 0,03 g/l è sottostimato di circa tre volte rispetto ai dati riportati nei libri di consultazione stranieri sulla diagnostica clinica di laboratorio.

    La stragrande maggioranza dei laboratori nei paesi occidentali ha abbandonato l'uso del metodo sulfosalicilico per determinare la concentrazione di proteine ​​nelle urine e utilizza attivamente il metodo al pirogallolo per questi scopi. Il metodo del pirogallolo per determinare la concentrazione proteica nelle urine e in altri fluidi biologici si basa sul principio fotometrico della misurazione della densità ottica di un complesso colorato formato dall'interazione delle molecole proteiche con le molecole del complesso pirogallolo rosso-molibdato.

    Perché il metodo del pirogallolo fornisce risultati più accurati per la misurazione della concentrazione di proteine ​​nelle urine? Innanzitutto a causa della maggiore diluizione del campione di urina nella miscela di reazione. Se nel metodo al solfosalicilico il rapporto campione di urina/reagente è 1/3, nel metodo al pirogallolo può variare da 1/12,5 a 1/60 a seconda della versione del metodo, il che riduce significativamente l'influenza della composizione dell'urina sul risultato della misurazione . In secondo luogo, la reazione avviene in un tampone succinato, cioè a pH stabile. E infine, il principio stesso del metodo è, si potrebbe dire, più “trasparente”. Il molibdato di sodio e il colorante rosso pirogallolo formano un complesso con una molecola proteica. Ciò porta al fatto che le molecole del colorante allo stato libero non assorbono la luce ad una lunghezza d'onda di 600 nm, ma assorbono la luce. Pertanto, sembriamo etichettare ciascuna molecola proteica con un colorante e come risultato otteniamo che la variazione della densità ottica della miscela di reazione ad una lunghezza d'onda di 600 nm è chiaramente correlata alla concentrazione proteica nelle urine. Inoltre, poiché l'affinità del rosso pirogallolo per le diverse frazioni proteiche è quasi la stessa, il metodo consente di determinare la proteina totale delle urine. Pertanto, il limite dei valori normali per la concentrazione di proteine ​​nelle urine è 0,1 g/l (è indicato in tutti i moderni manuali occidentali di diagnostica clinica e di laboratorio, inclusa la “Guida clinica ai test di laboratorio”, a cura di N. TITS ). Caratteristiche comparative I metodi con pirogallolo e solfosalicilico per la determinazione delle proteine ​​nelle urine sono presentati nella Tabella 1.

    In conclusione, vorrei sottolineare ancora una volta il fatto che quando un laboratorio passa dal metodo sulfosalicilico per la determinazione delle proteine ​​nelle urine al metodo al pirogallolo, il limite dei valori normali aumenta notevolmente (da 0,03 g/l a 0,1 g/ l!). Il personale di laboratorio deve informare i medici di questo, perché nella situazione attuale la diagnosi di proteinuria può essere fatta solo se il contenuto proteico nelle urine supera 0,1 g/l.

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