Protein dalam urin, tes laboratorium. Penentuan kualitatif protein dalam urin

Proteinuria adalah munculnya protein dalam urin dalam konsentrasi yang memungkinkan untuk dideteksi dengan metode kualitatif.

Membedakan

• Proteinuria ginjal dan
• Proteinuria ekstrarenal (postrenal).

Proteinuria ginjal

Proteinuria ginjal disebabkan oleh kerusakan filter glomerulus atau disfungsi epitel tubulus berbelit-belit.

Ada proteinuria selektif dan non-selektif tergantung pada rasio plasma tertentu dan protein urin, berat molekul dan muatannya.

Proteinuria selektif

Proteinuria selektif terjadi dengan gangguan minimal (seringkali reversibel) pada filter glomerulus dan diwakili oleh protein dengan berat molekul rendah (berat molekul tidak lebih tinggi dari 68.000) - albumin, seruloplasmin, transferin.

Proteinuria non-selektif

Proteinuria nonselektif lebih sering terjadi pada kerusakan filter yang lebih parah, ketika protein molekul besar mulai hilang. Selektivitas proteinuria merupakan tanda diagnostik dan prognostik yang penting.

Proteinuria ginjal dapat berupa:

• organik dan
• fungsional (fisiologis).

Proteinuria ginjal organik

Proteinuria ginjal organik terjadi ketika ada kerusakan organik pada nefron. Tergantung pada mekanisme terjadinya yang dominan, jenis proteinuria organik tertentu dapat dibedakan.

Proteinuria glomerulus

Proteinuria glomerulus - disebabkan oleh kerusakan filter glomerulus, terjadi pada glomerulonefritis dan nefropati yang berhubungan dengan penyakit metabolik atau pembuluh darah. (glomerulonefritis, hipertensi, faktor infeksi dan alergi, dekompensasi jantung)

Proteinuria berbentuk tabung

Proteinuria tubular dikaitkan dengan ketidakmampuan tubulus untuk menyerap kembali protein plasma dengan berat molekul rendah yang telah melewati filter glomerulus yang tidak berubah. (amiloidosis, nekrosis tubular akut, nefritis interstisial, sindrom Fanconi)

Proteinuria prerenal

Proteinuria prerenal (berlebihan) - berkembang dengan adanya konsentrasi plasma protein berat molekul rendah yang luar biasa tinggi, yang disaring oleh glomeruli normal dalam jumlah yang melebihi kapasitas fisiologis tubulus untuk reabsorpsi. (mieloma, nekrosis otot, hemolisis eritrosit)

Proteinuria ginjal fungsional

Proteinuria ginjal fungsional tidak berhubungan dengan penyakit ginjal dan tidak memerlukan pengobatan.

Proteinuria fungsional meliputi:

• berbaris,
• emosional,
• dingin,
• kemabukan,
• ortostatik (hanya pada anak-anak dan hanya dalam posisi berdiri).

Proteinuria ekstrarenal (postrenal).

Dengan proteinuria ekstrarenal (postrenal), protein dapat masuk ke urin dari saluran kemih dan genital (dengan kolpitis dan vaginitis - dengan pengumpulan urin yang tidak tepat). DI DALAM pada kasus ini ini tidak lebih dari campuran eksudat inflamasi.

Proteinuria ekstrarenal, biasanya, tidak melebihi 1 g/hari, dan seringkali bersifat sementara.

Diagnosis proteinuria ekstrarenal difasilitasi dengan tes tiga gelas dan pemeriksaan urologi.

Proteinuria postrenal terjadi dengan sistitis dan uretritis.

Metode penentuan protein dalam urin

Suatu kondisi yang diperlukan Saat melakukan tes untuk mengetahui keberadaan protein, urin benar-benar transparan.

Sampel kualitatif

Uji dengan asam sulfosalisilat

3-4 ml urin yang telah disaring dituangkan ke dalam dua tabung reaksi. Tambahkan 6–8 tetes larutan asam sulfosalisilat 20% ke dalam tabung reaksi. Tabung kedua adalah kontrol. Dengan latar belakang gelap, bandingkan tabung kontrol dengan tabung eksperimen. Jika terdapat protein dalam sampel urin, kekeruhan opalescent akan muncul.

Hasilnya ditunjukkan sebagai berikut:

• reaksi positif lemah (+),
• positif(++),
• sangat positif (+++).

Sampelnya sangat sensitif.

Anda juga dapat menggunakan sampel kering, ketika beberapa kristal asam sulfosalisilat atau kertas saring yang telah diresapi dengan larutan asam ini ditambahkan ke beberapa mililiter urin.

Positif Palsu dapat disebabkan oleh penggunaan sediaan yodium, obat sulfonamida, penisilin dosis besar dan adanya asam urat dalam konsentrasi tinggi dalam urin.

Tes asam nitrat (tes Geller)

1–2 ml larutan asam nitrat 50% dituangkan ke dalam tabung reaksi, kemudian urin dalam jumlah yang sama dilapiskan pada asam tersebut. Ketika terdapat protein, cincin putih muncul pada antarmuka dua cairan. Terkadang cincin kemerahan terbentuk sedikit di atas batas antara cairan. ungu dari adanya urat. Cincin urat, tidak seperti cincin protein, larut dengan sedikit pemanasan.

Sampel cerah

Tes Bright Boil dan tes skrining proteinuria (sampel kolorimetri kering) hampir tidak memerlukan reagen.

Ketika urin yang mengandung protein direbus, ia mengalami denaturasi, membentuk endapan atau serpihan seperti awan yang tidak larut dalam asam asetat 6%, tidak seperti garam fosfat. Tes skrining didasarkan pada kemampuan protein (albumin) untuk mengubah warna kertas yang dilapisi dengan indikator (biasanya bromofenol biru) dan buffer. Hubungan langsung antara intensitas warna kertas indikator (Albufan, Albutest - Republik Ceko; Labstix, Multistix - USA; Comburtest - Jerman) dan jumlah protein memungkinkan kita memperkirakan secara kasar jumlah proteinuria. Namun, tes skrining yang digunakan saat ini bukannya tanpa kelemahan. Secara khusus, bromofenol biru tidak mendeteksi protein Bence Jones.

Metode kuantitatif

Metode Brandberg-Roberts-Stolnikov

Metode ini didasarkan pada sampel kualitatif dengan asam nitrat. Prosedur pengujian dijelaskan di atas. Munculnya cincin tipis pada batas dua cairan antara menit ke-2 dan ke-3 setelah pelapisan menunjukkan adanya 0,033 g/l protein dalam urin (konsentrasi protein dalam urin biasanya dinyatakan dalam ppm, yaitu, gram per liter). Jika cincin muncul lebih awal dari 2 menit, urin harus diencerkan dengan air. Pilih pengenceran urin sedemikian rupa sehingga bila dilapiskan pada asam nitrat, muncul cincin pada menit ke-2-3. Tingkat pengenceran tergantung pada lebar dan kekompakan cincin serta waktu kemunculannya.

Konsentrasi protein dihitung dengan mengalikan 0,033 g/l dengan derajat pengenceran urin (Tabel 8).

Metode pengenceran Roberts-Stolnikov memiliki sejumlah kelemahan: subjektif, padat karya, dan keakuratan penentuan konsentrasi protein menurun seiring dengan pengenceran urin.

Metode yang paling mudah dan akurat adalah metode nefelometri dan biuret.

Metode nefelometri

Berdasarkan sifat protein menghasilkan kekeruhan dengan asam sulfosalisilat, yang intensitasnya sebanding dengan konsentrasi protein. 1,25 ml urin yang telah disaring dituangkan ke dalam tabung reaksi bertingkat dan ditambahkan larutan asam sulfosalisilat 3% hingga volume 5 ml, diaduk rata. Setelah 5 menit, kepunahan diukur pada FEK-M (atau fotometer lainnya) pada panjang gelombang 590–650 nm (filter oranye atau merah) terhadap kontrol dalam kuvet dengan ketebalan lapisan 0,5 cm Untuk kontrol, 1,25 ml urin yang disaring digunakan ( sama), yang ditambahkan larutan natrium klorida isotonik hingga volume 5 ml.

Kurva kalibrasi ketergantungan nilai kepunahan pada konsentrasi protein pertama kali dibuat. Untuk menyiapkan berbagai konsentrasi protein, digunakan larutan albumin standar (dari serum manusia atau sapi). Isi lembar kerja.

metode biuret

Hal ini didasarkan pada kemampuan protein untuk menghasilkan, dengan tembaga sulfat dan alkali kaustik, kompleks biuret berwarna ungu, yang intensitas warnanya berbanding lurus dengan jumlah protein. Ke dalam 2 ml urin tambahkan 2 ml larutan asam trikloroasetat untuk mengendapkan protein dan disentrifugasi. Cairan supernatan dibuang. 4 ml larutan NaOH 3% dan 0,1 ml larutan tembaga sulfat 20% ditambahkan ke dalam endapan (protein), diaduk dan disentrifugasi. Cairan supernatan ungu difotometer pada panjang gelombang 540 nm (filter hijau) terhadap air suling dalam kuvet dengan ketebalan lapisan 1,0 cm. Konsentrasi protein ditentukan dari tabel yang diperoleh secara eksperimental (kurva kalibrasi dibuat seperti pada sebelumnya metode).

Tes ortostatik

Diindikasikan untuk dugaan proteinuria ortostatik dan nefroptosis. Setelah pengosongan total Kandung kemih Subjek mempertahankan posisi horizontal selama 2 jam, kemudian tanpa bangun, ia memberikan satu porsi (kontrol) urin. Selama 2 jam berikutnya, subjek berjalan terus menerus, mempertahankan posisi lordosis lumbal maksimum (memegang tongkat di belakang punggung bawah), setelah itu ia mengeluarkan urin porsi kedua. Pada kedua bagian urin, konsentrasi protein dan kandungan protein dalam gram ditentukan, dan pada nefroptosis, jumlah sel darah merah dalam 1 ml ditentukan. Dengan proteinuria ortostatik, proteinuria atau peningkatan kandungan protein awal dalam gram terdeteksi pada porsi kedua. Munculnya hematuria, seringkali dikombinasikan dengan sedikit proteinuria pada bagian kedua, merupakan ciri khas nefroptosis.

Penentuan uroprotein Bence Jones

Protein Bence Jones adalah paraprotein dengan berat molekul rendah yang labil terhadap panas (berat molekul relatif 20.000–45.000) yang ditemukan terutama pada multiple myeloma dan makroglobulinemia Waldenström. Mereka adalah rantai ringan imunoglobulin. Karena berat molekulnya yang rendah, rantai L dengan mudah berpindah dari darah melalui filter ginjal yang utuh ke dalam urin dan dapat dideteksi di sana menggunakan reaksi termopresipitasi. Dianjurkan untuk melakukan penelitian hanya jika tes dengan asam sulfosalisilat positif. Penetapannya dilakukan sebagai berikut. Ke dalam 10 ml urin tambahkan 3-4 tetes larutan asam asetat 10% dan 2 ml larutan natrium klorida jenuh, panaskan perlahan dalam penangas air, naikkan suhu secara bertahap. Jika terdapat protein Bence Jones dalam urin, maka pada suhu 45–60 ° C muncul kekeruhan difus atau terbentuk endapan putih pekat. Ketika dipanaskan lebih lanjut hingga mendidih, endapan larut, dan ketika didinginkan, endapan itu muncul kembali. Tes ini tidak cukup sensitif dan harus diuji dengan elektroforesis dan imunoelektroforesis.

Banyak penyakit terjadi tanpa gejala yang jelas manifestasi klinis Oleh karena itu, penentuan protein dalam urin untuk tujuan deteksi dan pengobatan tepat waktu kondisi patologis adalah poin penting untuk pengobatan praktis.

Protein dalam urin dapat ditentukan dengan metode kualitatif dan kuantitatif.

Metode kualitatif

Saat ini ada sekitar 100 yang diketahui reaksi kualitatif untuk protein. Mereka melibatkan pengendapan protein melalui tindakan fisik atau kimia. Dengan reaksi positif, terjadi kekeruhan.

Tes yang paling informatif adalah:

• Dengan asam sulfosalisilat. Ini dianggap paling sensitif dan dengan bantuannya dimungkinkan untuk menentukan jumlah terkecil dari badan protein dalam urin. Deskripsi hasil dengan sedikit protein disebut dengan istilah "opalescence", dan dengan jumlah yang lebih besar - "positif lemah", "positif" dan dengan kehilangan banyak protein dalam urin - "reaksi sangat positif" .
• Dengan pengganti asam - aseptol. Suatu larutan zat ditambahkan ke dalam urin, dan bila terbentuk cincin pada batas larutan, sampel dikatakan positif.
• Geler. Diproduksi menggunakan larutan asam nitrat. Hasil dari prosedur ini ditafsirkan serupa dengan Aseptol. Kadang-kadang sebuah cincin mungkin muncul ketika ada urat dalam cairan uji.
• Dengan asam asetat dengan penambahan kalium sulfur dioksida. Jika konsentrasi urin tinggi saat melakukan tes seperti itu, maka akan encer, jika tidak, hasil positif palsu dapat terjadi, karena reaksinya adalah terhadap urat dan asam urat.

Melakukan tes semacam itu secara tidak benar seringkali dapat memberikan hasil yang salah pada bayi baru lahir, karena urin mereka mengandung asam urat yang tinggi.

Aturan dasar dalam melakukan pengujian adalah sebagai berikut: urin yang diuji harus transparan, memiliki lingkungan yang sedikit asam (untuk ini kadang-kadang ditambahkan sedikit asam asetat ke dalamnya), harus ada dua tabung reaksi untuk pemantauan.

kuantisasi

Saat tes urin dilakukan, total protein juga ditentukan dengan menggunakan metode kuantitatif. Ada beberapa di antaranya, namun yang paling umum digunakan adalah sebagai berikut:

• metode Esbach. Digunakan sejak abad ke-19. Untuk melakukan ini, urin dan reagen dituangkan ke dalam tabung reaksi tertentu. Kemudian adonan dikocok sedikit dan dibiarkan tertutup selama 24-48 jam. Endapan yang dihasilkan dihitung dengan pembagian pada tabung reaksi. Kesimpulan yang benar hanya dapat diambil dengan urin yang bersifat asam. Teknik ini cukup sederhana, namun tidak memiliki akurasi yang tinggi dan memakan waktu.
• Metode Brandberg-Stolnikov. Berdasarkan uji Heller, yang memungkinkan diperoleh hasil dengan konsentrasi protein lebih dari 3,3 mg%. Belakangan metode ini dimodifikasi dan disederhanakan.
• Metode nefelometri untuk menentukan jumlah protein banyak digunakan.

Untuk memahami sepenuhnya jumlah protein, yang terbaik adalah menggunakan tes urin untuk mengetahui protein harian.

• Untuk hasil yang benar porsi pagi pertama dituang, pengumpulan dimulai dengan porsi kedua dalam satu wadah, disarankan disimpan di lemari es.

Porsi terakhir dikumpulkan pada pagi hari. Setelah itu, Anda perlu mengukur volumenya, lalu aduk rata, dan tuangkan porsi tidak lebih dari 50 ml ke dalam stoples. Wadah ini harus diserahkan ke laboratorium. Formulir khusus mengharuskan Anda untuk menunjukkan hasil total volume urin harian, serta tinggi dan berat badan pasien.

Menggunakan strip tes

Tes protein urin beroperasi berdasarkan prinsip indikator. Strip khusus dapat berubah warna tergantung konsentrasi protein. Mereka mudah digunakan untuk menentukan perubahan yang terjadi pada waktu yang berbeda, dan digunakan baik di rumah maupun di institusi medis dan pencegahan mana pun

Strip tes urin digunakan sesuai kebutuhan definisi awal dan melacak hasil pengobatan untuk patologi genitourinari. Teknik diagnostik ini sensitif dan bereaksi terhadap albumin pada konsentrasi 0,1 g/l, dan memungkinkan Anda menentukan perubahan kualitatif dan semikuantitatif pada kandungan protein dalam urin.

Berdasarkan hasil diagnosis ini, Anda dapat memantau efektivitas terapi, melakukan koreksi, dan meresepkan diet yang diperlukan.

Semua metode untuk menentukan protein dalam urin didasarkan pada koagulasi protein di bawah pengaruh bahan kimia atau termal. Jika ada protein dalam urin, muncul kekeruhan, yang derajatnya tergantung pada jumlah protein.

A) sampel berkualitas penentuan protein dalam urin adalah wajib.

1. Uji dengan asam nitrat– dengan hati-hati tambahkan urin dalam jumlah yang sama ke dalam tabung reaksi dengan 1-2 ml larutan asam nitrat 50%, usahakan jangan sampai cairannya terguncang. Jika ada protein dalam urin, cincin putih muncul di perbatasan kedua cairan, lebih terlihat dengan latar belakang hitam.

2. Uji dengan asam sulfasalisilat– 4-5 ml urin dituangkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 8-10 tetes reagen. Jika terdapat protein dalam urin, tergantung jumlahnya, kekeruhan atau flokulasi dapat terjadi.

3. Tes ekspres (sampel diagnostik kering)– selembar kertas indikator Albufan direndam dalam urin yang diuji sehingga kedua zona indikator dapat dibasahi secara bersamaan (zona atas untuk menentukan pH, zona bawah untuk menentukan protein). Setelah 2-3 detik, strip diletakkan di atas piring kaca putih. Penilaian dilakukan 60 detik setelah strip dibasahi dengan urin, menggunakan skala warna yang dicetak pada kotak pensil dengan strip indikator.

B) sampel kuantitatif– dilakukan pada bagian urin di mana protein terdeteksi selama penentuan kualitatif; penentuan dilakukan pada lapisan supernatan setelah sentrifugasi

Metode Brandberg-Roberts-Stolnikov– 1-3 ml larutan asam nitrat 50% dituangkan ke dalam tabung reaksi dan urin dalam jumlah yang sama dilapiskan dengan hati-hati di sepanjang dinding. Waktu dicatat pada stopwatch. Jika cincin pada antarmuka cairan terbentuk segera atau sebelum 2 menit setelah pelapisan, urin harus diencerkan dengan air. Setelah itu, protein ditentukan lagi dalam urin encer. Pengenceran dilakukan sampai muncul cincin putih antara menit ke-2 dan ke-3 ketika urin encer diberi asam nitrat. Jumlah protein ditentukan dengan mengalikan 0,033 ppm dengan laju pengenceran.

18. Teknik pengambilan apusan flora, gonokokus, trikomonas, pemeriksaan sitologi, KPI.

Teknik pengambilan apusan flora: bahan diambil dari saluran serviks dan dari uretra dengan sikat khusus di bawah kendali visual. Sampel yang dihasilkan segera ditempatkan pada kaca objek dan digiling.

Teknik pengambilan apusan Trichomonas: pertama, bahan diambil dengan cara dikerok pada selaput lendir uretra (setelah dipijat terlebih dahulu selama 1 menit pada simfisis pubis) dan forniks posterior vagina, kemudian bagian vagina serviks dilap dengan steril. usap yang dibasahi dengan larutan garam, sumbat lendir dihilangkan, dan saluran serviks masukkan probe dengan hati-hati hingga kedalaman tidak lebih dari 1,0-1,5 cm dan ambil kerokan dari selaput lendir serviks.

Teknik pengambilan apusan gonokokus: bahan diambil dari uretra, kelenjar Bartholin dan saluran paraurethra setelah dilap dengan kapas yang dibasahi larutan garam, pinset vagina atau alat khusus. Bahan diambil dari rektum dengan sendok tumpul. Dalam kasus gonore kronis dan lamban, provokasi dilakukan sebelum penelitian untuk meningkatkan kemungkinan mengidentifikasi patogen.

Anda tidak bisa mengambil bahan dengan kapas saat menstruasi.

Teknik pengambilan apusan untuk pemeriksaan sitologi: apusan diambil dari permukaan eksoserviks, vagina dan vulva dengan menggunakan spatula, dari endoserviks menggunakan endo-brush. Bahan tersebut diaplikasikan dalam lapisan tipis pada kaca dihilangkan lemaknya yang diberi perlakuan khusus dan diberi komposisi khusus untuk mencegah sel mengering. Sediaan diwarnai dengan metode Papanicolaou (disebut PAP smear) dan diperiksa di bawah mikroskop.

Indeks Karyopyknotic– persentase sel superfisial dengan inti piknotik terhadap sel dengan inti vesikular (non-piknotik). CPI pada awal fase folikuler siklus menstruasi 25-30%, pada saat ovulasi 60-70%, pada fase luteal menurun hingga 25%.

Urin merupakan cairan biologis penting dalam tubuh manusia. Sebagian besar produk metabolisme dikeluarkan bersamanya. Pada orang sehat, komposisinya mempunyai nilai yang relatif tetap. Ketika suatu penyakit terjadi, beberapa indikator berubah, yang memungkinkan dokter yang merawat untuk memperjelas diagnosis. Menguji protein urin 24 jam akan membantu mengidentifikasi masalah pada ginjal Anda.

Analisis urin harian atau diuresis harian

Ini adalah tes laboratorium yang menentukan jumlah cairan yang dikeluarkan per hari. Metode ini digunakan untuk menilai keadaan fungsi ginjal. Komposisi urin:

Setiap komponen biasanya mengandung jumlah tertentu, penyimpangannya dianggap sebagai patologi. Saat mempelajari asupan protein harian, norma untuk pria dan wanita dewasa adalah sama. Selama fungsi ginjal normal, zat ini tidak boleh masuk ke dalam urin atau mungkin mengandung sejumlah kecil 40-80 mg. Keluarnya 150 mg atau lebih dianggap patologis. Namun seiring bertambahnya usia, terutama setelah 60 tahun, sedikit kelebihan diperbolehkan. indikator yang dapat diterima, dan ini ada hubungannya dengan perubahan terkait usia dalam organisme. Dalam beberapa kasus, deteksi protein disebabkan oleh persiapan yang tidak tepat sebelum pengumpulan biomaterial atau kesalahan nutrisi. Pada anak-anak, normanya tergantung pada usia, berat badan dan luas permukaan tubuh.

informasi Umum

Berdasarkan hasil pemeriksaan laboratorium urin harian diperoleh informasi sebagai berikut:

• Volume cairan yang dikeluarkan dari tubuh pada siang hari. Rata-rata 1.750 ml dan dapat berfluktuasi naik dan turun tergantung volume cairan yang diminum.
• Gula. Indikator ini sangat penting bagi pasien yang menderita diabetes.
• Oksalat. Melebihi batas yang diijinkan penuh dengan pembentukan pasir dan batu di ginjal.
• Metanefrin. Zat ini terbentuk setelah pemecahan hormon. Penyimpangan dari norma ke arah peningkatan merupakan tanda patologi ginjal, dari sistem kardio-vaskular dan sebagainya.
• Protein. Pada orang sehat, indikator ini tidak boleh diamati dalam urin. Ini adalah salah satu parameter penting yang terdeteksi selama analisis urin harian. Peningkatan kadar menunjukkan tanda-tanda patologi ginjal dan penyakit pada sistem saraf pusat. Selain jumlah total protein, pengujian laboratorium terhadap cairan biologis juga dapat mendeteksi senyawa protein, yang juga penting untuk diagnosis yang benar.

Indikasi untuk meresepkan tes urin 24 jam untuk protein

Karena kenyataan bahwa perubahan komposisi kualitatif dan kuantitatif urin dimulai lebih awal dari gejala penyakit, analisis ini memungkinkan deteksi patologi secara tepat waktu. Indikasi penelitian jenis ini pada orang dewasa dan anak-anak adalah adanya penyakit berikut:

• amiloidosis (gangguan metabolisme protein);
• diabetes mellitus;
• nefropati, yang memanifestasikan dirinya sebagai pembengkakan pada kaki;
• iskemia jantung;
• gagal ginjal.

Selain itu, ini diresepkan ketika pasien mengonsumsi obat-obatan tertentu: aminoglikosida, inhibitor ACE, diuretik thiazide dan beberapa obat lain.

Tahap persiapan

Agar lebih informatif dan memperoleh informasi yang paling obyektif berdasarkan hasil analisis protein urin harian, sebaiknya mengikuti aturan tertentu yang bersifat wajib yaitu sebagai berikut:

• Selama sehari atau lebih, hilangkan penggunaan vitamin kompleks, antikoagulan, dan diuretik.
• Ubah pola makan Anda sehari sebelumnya. Hindari makanan pedas, berlemak dan manis, serta minuman beralkohol dan kopi.
• Jangan menyumbangkan biomaterial saat menstruasi.
• Untuk menampung urine, belilah wadah khusus di apotek atau bisa juga digunakan toples kaca, dengan volume minimal tiga liter.

untuk analisis protein?

Aturan pengumpulan biomaterial bersifat umum baik bagi pria maupun wanita dewasa serta anak-anak yang telah mencapai usia tertentu dan dapat menggunakan pispot secara mandiri.

1. Segera sebelum mengumpulkan urin, perlu dilakukan toilet pada alat kelamin luar.
2. Bagian pertama dari biomaterial tidak diperhitungkan. Namun, waktu buang air kecil pagi hari dicatat.
3. Kumpulkan semua cairan yang disekresikan selama 24 jam. Pengumpulan urin juga berlanjut pada malam hari.
4. Disarankan untuk menyimpan wadah dengan biomaterial pada suhu tidak lebih tinggi dari 8 derajat dan tidak lebih rendah dari 5.
5. Segera setelah mengumpulkan bagian terakhir, urin yang dikumpulkan harus tercampur rata.
6. Anda harus terlebih dahulu bertanya kepada dokter Anda bagaimana cara menyerahkan tes urin harian untuk mengetahui protein ke laboratorium. Ada dua cara. Sekitar 100 ml biomaterial dituangkan ke dalam wadah ukuran kecil dan dibawa ke laboratorium atau seluruh volume harian dapat dikirim dalam wadah besar.
7. Dalam kasus di mana perubahan diuresis per hari penting, dokter menyarankan untuk mencatat volume cairan yang dikonsumsi selama 24 jam.

Bagaimana cara melakukan tes urin harian untuk protein untuk anak di bawah satu tahun? Pertanyaan ini menarik minat para ibu muda. Saat meresepkan penelitian semacam itu untuk anak-anak, dokter anak menyarankan untuk membeli alat khusus untuk mengumpulkan biomaterial, yang dijual bebas di apotek. Anda tidak boleh memeras cairan dari popok atau menangkap momen saat bayi ingin buang air kecil.

Proteinuria atau protein dalam urin 24 jam

Istilah ini mengacu pada tingginya kadar zat protein dalam urin. Ini digunakan untuk memantau fungsi ginjal. Ada beberapa jenis proteinuria berikut. Ringan - bukan pertanda penyakit dan terjadi karena alasan alami. Sedang dan berat - jenis ini menunjukkan masalah pada fungsi ginjal. Dalam kasus ini, selain protein pada tes urine 24 jam, terdapat gejala seperti:

• sakit tulang;
• pusing;
• kehilangan selera makan;
• kantuk;
• mual;
• muntah;
• kelelahan yang parah.

Alasan munculnya protein dalam urin:

• gagal jantung;
• penyakit pada sistem saraf pusat;
• hipertiroidisme;
• endokarditis infektif.

Perubahan komposisi urin ditunjukkan dengan warnanya; munculnya warna keputihan merupakan tanda adanya albumin, suatu zat protein.

Jenis proteinuria

Faktor utama yang mempengaruhi munculnya senyawa protein dalam urin adalah masalah penyerapan zat tersebut. Proteinuria dibedakan:

• kanalikuli. Pada beberapa penyakit, penyerapan protein tidak mungkin atau sulit dilakukan.
• Glomerulus. Dalam hal ini, molekul protein tidak tertahan dan dikeluarkan bersama cairan. Fenomena ini khas untuk patologi berikut: pielonefritis, kerusakan ginjal akibat racun, glomerulonefritis.
• Ekstrarenal. Kerusakan hadir saluran kemih, karakteristik uretritis, kolpitis dan sistitis.

Untuk menentukan jenis proteinuria digunakan pemeriksaan mikroskopis. Selanjutnya, jika perlu, dokter meresepkan jenis pemeriksaan lain, termasuk USG, pencitraan resonansi magnetik, dan metode perangkat keras lainnya.

Protein dalam urin selama kehamilan. Penyebab

Protein merupakan bahan pembangun yang berperan dalam berbagai proses dalam tubuh individu. Deteksinya dalam urin dianggap sebagai tanda perkembangan proses patologis. Sel-sel ginjal kehilangan integritasnya dan protein memasuki urin bersama dengan zat-zat berbahaya, dan penyebab kegagalan ini adalah proses inflamasi pada ginjal. Analisis urin memungkinkan Anda mengenali penyakit dan memverifikasinya dengan cepat pengoperasian yang benar ginjal selama periode paling bertanggung jawab dan penting dalam kehidupan seorang wanita. Apa pun, bahkan deteksi protein sekecil apa pun pada wanita hamil dalam tes urine harian adalah tanda timbulnya perkembangan patologi. Penyebab kemunculannya adalah penyakit-penyakit berikut:

• glomerulonefritis;
• lupus eritematosus;
• nefritis;
• hipertensi;
• diabetes mellitus.

Serta proses infeksi dan inflamasi pada ginjal, cedera mekanis, luka bakar, hipotermia, keracunan zat beracun atau pengobatan neoplasma ganas dengan obat kemoterapi sebelum kehamilan.

Kehamilan yang aman

Untuk mendiagnosis penyakit ginjal, metode sederhana digunakan - tes urin harian untuk mengetahui protein. Pemenuhan ketentuan untuk koleksi yang benar urin adalah suatu keharusan bagi setiap wanita hamil.

1. Alat kelamin luar harus bersih. Anda bisa mencuci diri menggunakan sabun biasa. Penggunaan antiseptik atau sediaan herbal dilarang karena akan merusak keandalan hasil.
2. Tampung urin dalam wadah yang bersih dan kering dengan leher lebar.

Jika protein terdeteksi dalam urin, dokter akan meresepkan pengobatan yang akan melindungi janin dari efek negatif penyakit yang menyebabkan munculnya zat protein dalam urin. Selanjutnya, Anda perlu mencari tahu penyebab fenomena ini. Dalam kebanyakan kasus, itu terletak pada gangguan pada ginjal. Munculnya protein pada biomaterial pada paruh kedua kehamilan merupakan salah satu gejala gestosis. Kemudian terjadi pembengkakan dan perubahan tekanan darah.

• tes urine harian untuk protein;
• kunjungan rutin ke dokter;
• kontrol tekanan;
• nutrisi ditingkatkan dengan vitamin kompleks;
• asupan cairan sedang;
• menghindari rempah-rempah dan, jika mungkin, garam atau mengurangi jumlahnya seminimal mungkin.

Untuk tujuan pencegahan, serta untuk mengurangi senyawa protein dalam urin, dokter mungkin akan meresepkan obat herbal atau ramuan herbal yang memiliki efek diuretik.

Pengobatan dan pencegahan

Anda harus mempercayakan interpretasi tes kepada dokter Anda. Jika terdeteksi alasan patologis munculnya zat protein dalam urin, terapi yang diperlukan hanya ditentukan pekerja medis. Tidak disarankan untuk mengobati sendiri dan terbawa suasana metode yang tidak konvensional. Saat mengidentifikasi penyebab yang tidak terkait dengan proses patologis, perhatikan Perhatian khusus diet. Penting untuk diingat bahwa efektivitas terapi tergantung pada diagnosis yang tepat waktu.

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Biasanya, protein dikeluarkan melalui urin dalam waktu yang relatif jumlah kecil, biasanya tidak lebih dari 100-150 mg/hari.

Diuresis harian pada orang sehat adalah 1000-1500 ml/hari; dengan demikian, konsentrasi protein dalam kondisi fisiologis adalah 8-10 mg/dL (0,08-0,1 g/L).

Total protein urin diwakili oleh tiga fraksi utama - albumin, mukoprotein dan globulin.

Albumin urin adalah bagian albumin serum yang telah disaring di glomeruli dan belum diserap kembali di tubulus ginjal; Ekskresi albumin normal melalui urin adalah kurang dari 30 mg/hari. Sumber protein utama lainnya dalam urin adalah tubulus ginjal, terutama tubulus bagian distal. Tubulus ini mengeluarkan dua pertiga dari jumlah total protein urin; dari jumlah ini, sekitar 50% diwakili oleh glikoprotein Tamm-Horsfall, yang disekresikan oleh epitel tubulus distal dan berperan penting dalam pembentukan batu saluran kemih. Protein lain ada dalam urin sebagian kecil dan berasal dari protein plasma dengan berat molekul rendah yang disaring oleh ginjal yang tidak diserap kembali oleh tubulus ginjal, mikroglobulin dari epitel tubulus ginjal (RTE), dan sekresi prostat dan vagina.

Proteinuria, yaitu peningkatan protein dalam urin, adalah salah satu gejala paling signifikan yang mencerminkan kerusakan ginjal. Namun, sejumlah kondisi lain juga bisa disertai proteinuria. Oleh karena itu, ada dua kelompok utama proteinuria: proteinuria ginjal (benar) dan ekstrarenal (salah).

Pada proteinuria ginjal, protein masuk ke urin langsung dari darah karena peningkatan permeabilitas filter glomerulus. Proteinuria ginjal sering terjadi dengan glomerulonefritis, nefrosis, pielonefritis, nefrosklerosis, amiloidosis ginjal, berbagai bentuk nefropati, misalnya nefropati kehamilan, kondisi demam, hipertensi, dll. Proteinuria juga dapat dideteksi pada orang sehat setelah aktivitas fisik yang berat, hipotermia, dan stres psikologis. Pada bayi baru lahir, proteinuria fisiologis diamati pada minggu-minggu pertama kehidupan, dan dengan asthenia pada anak-anak dan remaja, dikombinasikan dengan pertumbuhan yang cepat pada usia 7-18 tahun, proteinuria ortostatik (dalam posisi tubuh tegak) mungkin terjadi.

Pada proteinuria palsu (ekstrarenal), sumber protein dalam urin adalah campuran leukosit, eritrosit, dan sel epitel. saluran kemih urothelium. Pemecahan unsur-unsur ini, terutama yang terlihat pada reaksi alkali urin, menyebabkan pelepasan protein ke dalam urin yang telah melewati filter ginjal. Khususnya tingkat tinggi proteinuria palsu menyebabkan adanya campuran darah dalam urin; dengan hematuria yang banyak, bisa mencapai 30 g/l atau lebih. Penyakit yang mungkin menyertai proteinuria ekstrarenal- urolitiasis, TBC ginjal, tumor ginjal atau saluran kemih, sistitis, pielitis, prostatitis, uretritis, vulvovaginitis.

Klasifikasi klinis meliputi proteinuria ringan (kurang dari 0,5 g/hari), sedang (0,5 hingga 4 g/hari), atau berat (lebih dari 4 g/hari).

Kebanyakan pasien dengan penyakit ginjal, seperti glomerulonefritis akut atau pielonefritis, memiliki proteinuria sedang, namun pasien dengan sindrom nefrotik biasanya mengeluarkan lebih dari 4 g protein melalui urin setiap hari.

Berbagai macam metode digunakan untuk penentuan kuantitatif protein, khususnya metode terpadu Brandberg-Roberts-Stolnikov, metode biuret, metode menggunakan asam sulfosalisilat, metode menggunakan pewarna biru Coomassie, pewarna merah pyrogallol, dll.

Penggunaan berbagai metode untuk menentukan protein dalam urin telah menyebabkan kebingungan serius dalam interpretasi batas normal kandungan protein dalam urin. Karena dua metode yang paling sering digunakan di laboratorium - dengan asam sulfosalisilat dan pewarna merah pirogalol, kami akan mempertimbangkan masalah kebenaran batas norma khusus untuk metode tersebut. Dari sudut pandang metode sulfosalicylic, dalam urin normal kandungan protein tidak boleh melebihi 0,03 g/l, dari sudut pandang metode pyrogallol - 0,1 g/l! Perbedaannya ada tiga kali lipat!!!

Rendahnya nilai konsentrasi normal protein dalam urin saat menggunakan asam sulfosalisilat disebabkan oleh hal-hal berikut:

• Kurva kalibrasi dibuat menggunakan larutan albumin berair. Komposisi urin sangat berbeda dengan air: pH, garam, senyawa dengan berat molekul rendah (kreatinin, urea, dll.). Akibatnya, menurut Altshuler, Rakov dan Tkachev, kesalahan dalam menentukan protein dalam urin bisa 3 kali lipat atau lebih! Itu. hasil penentuan yang benar hanya dapat diperoleh jika kadar urin sangat rendah berat jenis dan dalam komposisi dan pHnya mendekati air;
• sensitivitas yang lebih tinggi dari metode sulfosalisilat terhadap albumin dibandingkan dengan protein lain (sementara, seperti disebutkan di atas, albumin dalam sampel urin normal tidak lebih dari 30% dari total protein urin);
• jika pH urin bergeser ke sisi basa, terjadi netralisasi asam sulfosalisilat, yang juga menyebabkan meremehkan hasil penentuan protein;
• laju sedimentasi presipitat mengalami variasi yang signifikan - pada konsentrasi protein rendah, presipitasi melambat, dan penghentian awal reaksi menyebabkan perkiraan hasil yang terlalu rendah;
• laju reaksi pengendapan sangat bergantung pada pengadukan campuran reaksi. Pada konsentrasi protein yang tinggi, pengocokan tabung yang kuat dapat menyebabkan pembentukan flok besar dan sedimentasinya yang cepat.

Semua fitur metode yang tercantum di atas menyebabkan perkiraan yang terlalu rendah terhadap konsentrasi protein yang ditentukan dalam urin. Namun, tingkat perkiraan yang terlalu rendah sangat bergantung pada komposisi sampel urin tertentu. Karena metode asam sulfosalisilat memberikan nilai konsentrasi protein yang diremehkan, batas normal untuk metode ini yaitu 0,03 g/l juga diremehkan sekitar tiga kali lipat dibandingkan dengan data yang diberikan dalam buku referensi asing tentang diagnostik laboratorium klinis.

Sebagian besar laboratorium di negara-negara Barat telah meninggalkan penggunaan metode sulfosalicylic untuk menentukan konsentrasi protein dalam urin dan secara aktif menggunakan metode pyrogallol untuk tujuan ini. Metode pyrogallol untuk menentukan konsentrasi protein dalam urin dan cairan biologis lainnya didasarkan pada prinsip fotometrik pengukuran kepadatan optik kompleks berwarna yang dibentuk oleh interaksi molekul protein dengan molekul kompleks Pyrogallol Red-Molybdate.

Mengapa metode pyrogallol memberikan hasil yang lebih akurat untuk mengukur konsentrasi protein dalam urin? Pertama, karena semakin besarnya pengenceran sampel urin dalam campuran reaksi. Jika pada metode sulfosalisilat rasio sampel/reagen urin adalah 1/3, maka pada metode pirogalol dapat berkisar antara 1/12,5 hingga 1/60 tergantung pada versi metodenya, yang secara signifikan mengurangi pengaruh komposisi urin terhadap hasil pengukuran. . Kedua, reaksi berlangsung dalam buffer suksinat, yaitu pada pH stabil. Dan terakhir, prinsip dari metode itu sendiri, bisa dikatakan, lebih “transparan”. Natrium molibdat dan pewarna merah pirogalol membentuk kompleks dengan molekul protein. Hal ini mengarah pada fakta bahwa molekul pewarna dalam keadaan bebas tidak menyerap cahaya pada panjang gelombang 600 nm; dalam kombinasi dengan protein, mereka menyerap cahaya. Jadi, kita memberi label pada setiap molekul protein dengan pewarna dan sebagai hasilnya kita memperoleh bahwa perubahan densitas optik campuran reaksi pada panjang gelombang 600 nm jelas berkorelasi dengan konsentrasi protein dalam urin. Selain itu, karena afinitas pirogalol merah terhadap fraksi protein yang berbeda hampir sama, metode ini memungkinkan untuk menentukan total protein urin. Oleh karena itu, batas nilai normal konsentrasi protein dalam urin adalah 0,1 g/l (ditunjukkan dalam semua manual Barat modern tentang diagnostik klinis dan laboratorium, termasuk dalam “Panduan Klinis untuk Uji Laboratorium”, diedit oleh N. Tits ) . Karakteristik komparatif metode pyrogallol dan sulfosalisilat untuk menentukan protein dalam urin disajikan pada Tabel 1.

Sebagai kesimpulan, saya ingin menekankan sekali lagi fakta bahwa ketika laboratorium beralih dari metode sulfosalicylic untuk menentukan protein dalam urin ke metode pyrogallol, batas nilai normal meningkat secara signifikan (dari 0,03 g/l menjadi 0,1 g/ aku!). Staf laboratorium harus memberi tahu dokter tentang hal ini, karena dalam situasi saat ini, diagnosis proteinuria hanya dapat ditegakkan jika kandungan protein dalam urin melebihi 0,1 g/l.

Bibliografi.

1. Altshuler B.Yu., Rakov S.S., Tkachev G.A. // Pertanyaan Sayang. kimia. - 2001. - No. 4. - Hlm.426-438.
2. Kim Yu.V., Potekhin O.E., Tokar M.I., Shibanov A.N. // laboratorium. Sayang. - 2003. - No. 6. - Hlm.94-98.
3. Panduan Klinis Uji Laboratorium, ed. N. Titsa. - M. - Unimed-pers.
4. Kozlov A.V., Slepysheva V.V. Metode penentuan protein dalam urin: kemungkinan dan prospek // Kumpulan karya VII Tahunan. SPb nefrol. seminar. - SPb : TNA. - 1999. - Hal.17-28.
5. Pupkova V.I., Pikalov I.V., Khrykina E.N., Kharkovsky A.V. // Berita "Vektor-Terbaik". - 2003. - Nomor 4 (30).
6. Chambers R.E., Bullock D.G., Yang mana J.T. // Ann. Klinik. Biokimia. - 1991. - Jil. 28 (Bagian 5). - Hlm.467-473.
7. Kedokteran Laboratorium Klinik. Ed. oleh Kenneth D. McClatchey. - Edisi ke-2-2001.- 1993p.
8. Eppel G.A., Nagy S., Jenkins M.A., Tudball R.N., Daskalakis M., Balazs N.D.H., Comper W.D. // Klinik. Biokimia. - 2000. - Jil. 33. - Hlm.487-494.
9. Franke G., Salvati M., Sommer R.G. Komposisi dan perangkat untuk pengujian protein urin dan metode penggunaannya sama // Paten AS No. 5326707. - 1994.
10. Kaplan I.V., Levinson S.S. // Klinik. kimia. - 1999. - Jil. 45. - Hlm.417-419.
11. Kashif W., Siddiqi N., Dincer H.E., Dincer A.P., Hirsch S. // Cleveland Clin. J. dari Med. - 2003. - Jil. 70 (6). - Hlm.535-547.
12. Koerbin G, Taylor L, Dutton J, Marshall K, Rendah P, Potter JM. // Klinik. kimia. - 2001. - Jil. 47. - Hlm.2183-2184.
13. Le Bricon T., Erlich D., Dussaucy M., Garnier J.P., Bousquet B. // Artikel dalam bahasa Prancis. - Ann. biologi. Klinik. (Paris). - 1998. - Jil. 56(6). - Hlm.719-723.
14. Marshall T., Williams K.M. // Klinik. kimia. - 2003. - Jil. 49 (12). - Hal.2111-2112.
15. Pugia M., Newman D.J., Lott J.A., D'Mello L., Clark L., Profitt J.A., Pemeran T. // Clin. Chim. tindakan. - 2002. - Jil. 326 (1-2). - Hal.177-183.
16. Ringsrud K.M., Linne J.J. Urinalisis dan cairan tubuh: A ColorText dan Atlas // Mosby. - 1995. - Hal.52-54.
17. Shepard M.D., Penberthy L.A. // Klinik. kimia. - 1987. - Jil. 33. - Hlm.792-795.
18. Williams K.M., Marshall T. // J. Biokimia. Biofisika. Metode. - 2001. - Jil. 47. - Hal.197-207.
19. Williams K.M., Arthur S.J., Burrell G., Kelly F., Phillips D.W., Marshall T. // J. Biochem. Biofisika. Metode. - 2003. - Jil. 57(1). - Hal.45-55.