• Baltymai šlapime, laboratoriniai tyrimai. Kokybinis baltymo nustatymas šlapime

    30.07.2019

    Proteinurija (proteinurija) - baltymų atsiradimas šlapime tokiomis koncentracijomis, kurios leidžia jį nustatyti kokybiniais metodais.

    Išskirti

    • Inkstų proteinurija ir
    • Ekstrarenalinė (postrenalinė) proteinurija

    Inkstų proteinurija

    Inkstų proteinurija atsiranda dėl glomerulų filtro pažeidimo arba vingiuotų kanalėlių epitelio disfunkcijos.

    Atskirkite selektyvią ir neselektyvią proteinuriją priklausomai nuo tam tikrų plazmos ir šlapimo baltymų santykio, jų molekulinės masės ir krūvio.

    Selektyvi proteinurija

    Selektyvi proteinurija atsiranda su minimaliu (dažnai grįžtamu) glomerulų filtro pažeidimu, kurį sudaro mažos molekulinės masės baltymai (molekulinė masė ne didesnė kaip 68 000) - albuminas, ceruloplazminas, transferinas.

    Neselektyvinė proteinurija

    Neselektyvinė proteinurija dažniau pasireiškia esant sunkesniam filtro pažeidimui, kai pradeda nykti stambiamolekuliniai baltymai. Proteinurijos selektyvumas yra svarbus diagnostinis ir prognozinis požymis.

    Inkstų proteinurija gali būti:

    • ekologiškas ir
    • funkcinis (fiziologinis).

    Organinė inkstų proteinurija

    Organinė inkstų proteinurija atsiranda su organiniu nefrono pažeidimu. Atsižvelgiant į vyraujantį atsiradimo mechanizmą, galima išskirti tam tikrus organinės proteinurijos tipus.

    Glomerulinė proteinurija

    Glomerulinė proteinurija – dėl glomerulų filtro pažeidimo, atsiranda sergant glomerulonefritu ir nefropatija, susijusia su medžiagų apykaitos ar kraujagyslių ligomis. (glomerulonefritas, hipertenzija, infekciniai ir alerginiai veiksniai, širdies dekompensacija)

    kanalėlių proteinurija

    Vamzdinė proteinurija – susijusi su kanalėlių nesugebėjimu reabsorbuoti plazmos mažos molekulinės masės baltymus, kurie praėjo per nepakitusią glomerulų filtrą. (amiloidozė, ūminė kanalėlių nekrozė, intersticinis nefritas, Fanconi sindromas)

    Prerenalinė proteinurija

    Prerenalinė proteinurija (pernelyg didelė) - išsivysto esant neįprastai didelei mažos molekulinės masės baltymo koncentracijai plazmoje, kuri filtruojama normalių glomerulų kiekiu, viršijančiu fiziologinį kanalėlių gebėjimą reabsorbuotis. (išsėtinė mieloma, raumenų audinio nekrozė, eritrocitų hemolizė)

    Funkcinė inkstų proteinurija

    Funkcinė inkstų proteinurija nėra susijusi su inkstų liga ir gydymo nereikia.

    Funkcinė proteinurija apima:

    • žygiavimas,
    • emocingas
    • šalta,
    • apsvaigimas,
    • ortostatinis (tik vaikams ir tik stovint).

    Ekstrarenalinė (postrenalinė) proteinurija

    Esant ekstrarenalinei (postrenalinei) proteinurijai, baltymai gali patekti į šlapimą iš šlapimo ir lytinių takų (su kolpitu ir vaginitu – su netinkamai surinktu šlapimu). AT Ši byla tai ne kas kita, kaip uždegiminio eksudato priemaiša.

    Ekstrarenalinė proteinurija paprastai neviršija 1 g per parą ir dažnai būna laikina.

    Ekstrarenalinę proteinuriją diagnozuoti padeda trijų puodelių testas ir urologinis tyrimas.

    Postrenalinė proteinurija pasireiškia su cistitu, uretritu.

    Baltymų kiekio šlapime nustatymo metodai

    Būtina sąlyga atliekant tyrimus dėl baltymų buvimo yra absoliutus šlapimo skaidrumas.

    Kokybiški pavyzdžiai

    Mėginys su sulfosalicilo rūgštimi

    Į du mėgintuvėlius supilama 3–4 ml filtruoto šlapimo. Į eksperimentinį mėgintuvėlį įlašinkite 6–8 lašus 20% sulfosalicilo rūgšties tirpalo. Antrasis vamzdis yra valdiklis. Tamsiame fone palyginkite kontrolinį mėgintuvėlį su eksperimentiniu. Jei šlapimo mėginiuose yra baltymų, atsiranda opalinis drumstumas.

    Rezultatas nurodomas taip:

    • reakcija yra silpnai teigiama (+),
    • teigiamas (++),
    • smarkiai teigiamas (+++).

    Mėginys yra labai jautrus.

    Taip pat galite naudoti sausą testą, kai į kelis mililitrus šlapimo pridedami keli sulfosalicilo rūgšties kristalai arba filtravimo popierius, iš anksto suvilgytas šios rūgšties tirpalu.

    Klaidingai teigiami rezultatai gali atsirasti dėl jodo preparatų, sulfatinių vaistų, didelių penicilino dozių ir didelės šlapimo rūgšties koncentracijos šlapime.

    Azoto rūgšties testas (Gellerio testas)

    Į mėgintuvėlį supilama 1–2 ml 50 % azoto rūgšties tirpalo, po to ant rūgšties sluoksniuojame tiek pat šlapimo. Esant baltymui, dviejų skysčių sąsajoje atsiranda baltas žiedas. Kartais šiek tiek virš skysčių ribos susidaro rausvas žiedas. violetinė nuo uratų buvimo. Uratų žiedas, skirtingai nei baltymų žiedas, ištirpsta šiek tiek kaitinant.

    Ryškus pavyzdys

    Atliekant Bright virimo testą ir proteinurijos atrankos testus (sausus kolorimetrinius mėginius) praktiškai nereikia reagentų.

    Kai šlapimas, kuriame yra baltymų, virinamas, jis denatūruojasi ir susidaro drumstos nuosėdos arba dribsniai, kurie netirpsta 6% acto rūgštyje, skirtingai nei fosfatinės druskos. Atrankos testai yra pagrįsti baltymo (albumino) gebėjimu pakeisti popieriaus, padengto indikatoriumi (dažniausiai bromfenolio mėlynu) ir buferiu, spalvą. Tiesioginis ryšys tarp indikatorinio popieriaus spalvos intensyvumo (Albufan, Albutest – Čekija; Labstix, Multistix – JAV; Comburtest – Vokietija) ir baltymų kiekio leidžia apytiksliai įvertinti proteinurijos kiekį. Tačiau šiuo metu naudojami atrankos testai nėra be trūkumų. Visų pirma, bromfenolio mėlynasis neaptinka Bence-Jones baltymo.

    Kiekybiniai metodai

    Brandbergo-Roberto-Stolnikovo metodas

    Metodas pagrįstas kokybiniu mėginiu su azoto rūgštimi. Testo eiga aprašyta aukščiau. Plono žiedo atsiradimas prie dviejų skysčių ribos 2–3 minutes po sluoksniavimo rodo, kad šlapime yra 0,033 g/l baltymų (baltymų koncentracija šlapime paprastai išreiškiama ppm, t. y. gramais litre ). Jei žiedas pasirodo anksčiau nei po 2 minučių, šlapimą reikia praskiesti vandeniu. Toks šlapimo skiedimas parenkamas taip, kad jį susluoksniavus ant azoto rūgšties žiedelis atsirastų 2-3 minutę. Skiedimo laipsnis priklauso nuo žiedo pločio ir kompaktiškumo bei jo atsiradimo laiko.

    Baltymų koncentracija apskaičiuojama 0,033 g/l padauginus iš šlapimo praskiedimo laipsnio (8 lentelė).

    Robertso-Stolnikovo skiedimo metodas turi nemažai trūkumų: jis yra subjektyvus, reikalaujantis daug laiko, baltymų koncentracijos nustatymo tikslumas mažėja skiedžiant šlapimą.

    Patogiausi ir tiksliausi yra nefelometriniai ir biuretiniai metodai.

    Nefelometrinis metodas

    Jis pagrįstas baltymo savybe sulfosalicilo rūgštimi suteikti drumstumo, kurio intensyvumas yra proporcingas baltymo koncentracijai. Į graduotą mėgintuvėlį supilama 1,25 ml filtruoto šlapimo ir iki 5 ml tūrio įpilama 3% sulfosalicilo rūgšties tirpalo, gerai išmaišoma. Po 5 minučių ekstinkcija matuojama FEK-M (arba bet kuriuo kitu fotometru) esant 590–650 nm bangos ilgiui (oranžinės arba raudonos šviesos filtras), lyginant su kontroline medžiaga kiuvetėje, kurios sluoksnio storis 0,5 cm. , naudojamas 1,25 ml filtruoto šlapimo (tas pats), į kurį įpilama izotoninio natrio chlorido tirpalo iki 5 ml tūrio.

    Kalibravimo kreivė preliminariai sudaroma atsižvelgiant į baltymų koncentracijos išnykimo vertę. Albumino standartinis tirpalas (iš žmogaus ar galvijų serumo) naudojamas įvairių koncentracijų baltymų paruošimui. Užpildykite darbalapį.

    Biureto metodas

    Jis pagrįstas baltymo savybe su vario sulfatu ir šarminiu šarmu suteikti violetinį biureto kompleksą, kurio spalvos intensyvumas yra tiesiogiai proporcingas baltymo kiekiui. Į 2 ml šlapimo įpilkite 2 ml trichloracto rūgšties tirpalo, kad baltymas nusodintų, ir centrifuguokite. Supernatantas išmetamas. Į nuosėdas (baltymus) įpilkite 4 ml 3% NaOH tirpalo ir 0,1 ml 20% vario sulfato tirpalo, išmaišykite ir centrifuguokite. Violetinis supernatantas fotometuojamas 540 nm bangos ilgiu (žalios šviesos filtras) prieš distiliuotą vandenį kiuvetėje, kurios sluoksnio storis 1,0 cm. Baltymų koncentracija nustatoma iš lentelės, gautos empiriškai (kalibravimo kreivė sudaryta kaip ankstesnėje metodas).

    Ortostatinis testas

    Skirtas esant įtariamai ortostatinei proteinurijai ir nefroptozei. Po visiško ištuštinimo Šlapimo pūslė tiriamasis išlaiko horizontalią padėtį 2 val.. Tada nepakeldamas išleidžia vieną (kontrolinę) šlapimo porciją. Per kitas 2 valandas tiriamasis nepertraukiamai vaikšto, išlaikydamas maksimalią juosmens lordozės padėtį (laiko lazdelę už apatinės nugaros dalies), po to išleidžia antrąją šlapimo porciją. Abiejose šlapimo porcijose nustatoma baltymų koncentracija ir baltymų kiekis gramais, o sergant nefroptoze – raudonųjų kraujo kūnelių skaičius 1 ml. Sergant ortostatine proteinurija, antroje porcijoje nustatoma proteinurija arba 2–3 kartus padidėjęs pradinis baltymų kiekis gramais. Hematurijos atsiradimas, dažnai kartu su pėdsakų proteinurija antroje dalyje, būdingas nefroptozei.

    Bence-Jones uroproteinų nustatymas

    Bence-Jones baltymai yra termolabilūs mažos molekulinės masės paraproteinai (santykinė molekulinė masė 20 000–45 000), daugiausia randami sergant daugybine mieloma ir Waldenströmo makroglobulinemija. Jie yra lengvos imunoglobulinų L grandinės. Dėl mažos molekulinės masės L grandinės lengvai patenka iš kraujo per nepažeistą inkstų filtrą į šlapimą ir ten gali būti nustatomos naudojant termoprecipitacijos reakciją. Tyrimą patartina atlikti tik su teigiamu sulfosalicilo rūgšties tyrimu. Apibrėžimas atliekamas taip. Į 10 ml šlapimo įlašinti 3–4 lašus 10% acto rūgšties tirpalo ir 2 ml sočiojo natrio chlorido tirpalo, švelniai pakaitinti vandens vonioje, palaipsniui didinant temperatūrą. Jei šlapime yra Bence-Jones baltymų, tada 45–60 ° C temperatūroje atsiranda difuzinis drumstumas arba susidaro tankios baltos nuosėdos. Toliau kaitinant iki virimo, nuosėdos ištirpsta, o aušinant vėl atsiranda. Šis mėginys nėra pakankamai jautrus ir turi būti patikrintas elektroforezės ir imunoelektroforezės būdu.

    Daugelis ligų atsiranda be ryškių klinikinės apraiškos, todėl baltymo nustatymas šlapime, siekiant laiku nustatyti ir gydyti patologinė būklė yra svarbus punktas praktinei medicinai.

    Baltymų kiekį šlapime galima nustatyti kokybiniais ir kiekybiniais metodais.

    Kokybiniai metodai


    Šiuo metu žinoma apie 100 kokybines reakcijas dėl baltymų. Jie susideda iš baltymų nusodinimo fizinio ar cheminio poveikio būdu. Esant teigiamai reakcijai, atsiranda drumstumas.

    Informatyviausi yra pavyzdžiai:

    • Su sulfosalicilo rūgštimi. Jis laikomas jautriausiu ir jo pagalba galima nustatyti net mažiausius baltymų kūnelių kiekius šlapime. Rezultato aprašymas, kai yra baltymų pėdsakų, nurodomas terminu „opalescencija“, o esant didesniam kiekiui - „silpnai teigiamas“, „teigiamas“ ir su dideliu baltymų praradimu šlapime – „stipriai teigiama reakcija“. .
    • Su rūgšties pakaitalu - aseptoliu. Į šlapimą įpilama medžiagos tirpalo, o kai prie tirpalų ribos susidaro žiedas, sakoma, kad mėginys teigiamas.
    • Geller. Pagaminta naudojant azoto rūgšties tirpalą. Elgesio rezultatas interpretuojamas panašiai kaip ir su aseptoliu. Kartais žiedas gali būti, kai tiriamajame skystyje yra uratų.
    • Su acto rūgštimi, pridedant selezistosinerodistinio kalio. Esant didelei šlapimo koncentracijai tokio tyrimo metu, jis praskiedžiamas, kitaip gali būti gautas klaidingas teigiamas rezultatas, nes reakcija bus į uratus ir šlapimo rūgštį.

    Neteisingai atliekant tokį tyrimą naujagimiams dažnai gali būti neteisingas rezultatas, nes jie gamina šlapimą, kuriame yra daug šlapimo rūgšties.


    Pagrindinės mėginių ėmimo taisyklės yra tokios - būtina, kad tiriamas šlapimas būtų skaidrus, turi šiek tiek rūgščią aplinką (tam kartais įpilama nedidelio kiekio acto rūgšties), kontrolei turi būti du mėgintuvėliai .

    kiekybinis įvertinimas


    Kai atliekamas šlapimo tyrimas, bendras baltymas nustatomas ir kiekybiniais metodais. Jų yra daug, tačiau dažniausiai naudojami šie:
    • Esbacho metodas. Naudojamas nuo XIX a. Norėdami tai padaryti, į tam tikrą mėgintuvėlį pilamas šlapimas ir reagentas. Tada mišinys šiek tiek pakratomas ir paliekamas uždarytas 24-48 valandas. Susidariusios nuosėdos skaičiuojamos pagal pasidalijimą mėgintuvėlyje. Teisingą išvadą galima padaryti tik su rūgštiniu šlapimu. Ši technika yra gana paprasta, tačiau ji nepasižymi dideliu tikslumu ir užima daug laiko.
    • Brandbergo-Stolnikovo metodas. Remiantis Hellerio testu, kuris leidžia gauti rezultatą, kai baltymų koncentracija yra didesnė nei 3,3 mg%. Vėliau šis metodas buvo modifikuotas ir supaprastintas.
    • Plačiai naudojami nefelometriniai baltymų kiekio nustatymo metodai.
    Norint visiškai suprasti baltymų kiekį, geriausia naudoti šlapimo tyrimą kasdieniniam baltymui nustatyti.
    • Dėl teisingas rezultatas pilama pirmoji rytinė porcija, rinkimas pradedamas nuo antros porcijos viename inde, kurią rekomenduojama laikyti šaldytuve.
    Paskutinė dalis surenkama ryte. Po to reikia išmatuoti tūrį, tada gerai išmaišyti ir supilti ne didesnę kaip 50 ml porciją į stiklainį. Šią talpyklą reikia nuvežti į laboratoriją. Specialioje formoje reikia nurodyti viso paros šlapimo kiekio rezultatus, taip pat paciento ūgį ir svorį.

    Bandymo juostelių uždėjimas


    Šlapimo baltymų tyrimas veikia rodiklių principu. Specialios juostelės gali keisti spalvą priklausomai nuo baltymų koncentracijos. Jie yra patogūs skirtingu metu vykstantiems pakitimams nustatyti, naudojami tiek namuose, tiek bet kuriose gydymo ir profilaktikos įstaigose.

    Kai reikia, naudojamos tiriamojo šlapimo juostelės ankstyvas apibrėžimas ir stebėti Urogenitalinių patologijų gydymo rezultatus. Šis diagnostikos metodas yra jautrus ir reaguoja į albuminą, kurio koncentracija yra nuo 0,1 g / l, ir leidžia nustatyti kokybinius ir pusiau kiekybinius baltymų kiekio pokyčius šlapime.

    Remiantis šios diagnozės rezultatais, galima stebėti gydymo veiksmingumą, jį koreguoti, paskirti reikiamą dietą.

    Visi baltymų nustatymo šlapime metodai yra pagrįsti baltymų krešėjimu, veikiant cheminiams ar terminiams veiksniams. Esant baltymui šlapime, atsiranda drumstumas, kurio laipsnis priklauso nuo baltymų kiekio.

    A) kokybės testai baltymų nustatymas šlapime – yra privalomi.

    1. Mėginys su azoto rūgštimi- mėgintuvėlyje su 1-2 ml 50% azoto rūgšties tirpalo atsargiai sluoksniuokite vienodą kiekį šlapimo, stengdamiesi nesupurtyti skysčio. Jei šlapime yra baltymų, prie dviejų skysčių ribos atsiranda baltas žiedas, geriau matomas juodame fone.

    2. Mėginys su sulfasalicilo rūgštimi- Į mėgintuvėlį supilama 4-5 ml šlapimo ir įlašinama 8-10 lašų reagento. Esant baltymui šlapime, priklausomai nuo jo kiekio, gali atsirasti drumstumas arba flokuliacija.

    3. Greitasis testas (sausasis diagnostikos testas)- indikatoriaus popieriaus juostelė „Albufan“ panardinama į tiriamąjį šlapimą, kad abi indikatoriaus zonos būtų drėkinamos vienu metu (viršutinė zona skirta pH, apatinė – baltymams). Po 2-3 sekundžių juostelė dedama ant balto stiklo plokštės. Įvertinimas atliekamas praėjus 60 sekundžių po juostelės sudrėkinimo šlapimu, naudojant spalvų skalę, atspausdintą ant korpuso su indikatorinėmis juostelėmis.

    B) kiekybiniai mėginiai- atliekama tose šlapimo dalyse, kuriose baltymas buvo rastas jo kokybinio nustatymo metu; nustatymas atliekamas supernatante po centrifugavimo

    Brandbergo-Roberto-Stolnikovo metodas- Į mėgintuvėlį supilama 1-3 ml 50% azoto rūgšties tirpalo ir tiek pat šlapimo atsargiai sluoksniuojama palei sienelę. Laikas įrašomas chronometru. Jei žiedas skysčių sąsajoje susidaro iš karto arba anksčiau nei po 2 minučių po sluoksniavimo, šlapimą reikia atskiesti vandeniu. Po to atliekamas pakartotinis baltymo nustatymas praskiestame šlapime. Skiedžiama tol, kol tarp 2 ir 3 minučių, kai praskiestas šlapimas pridedamas prie azoto rūgšties, atsiranda baltas žiedas. Baltymų kiekis nustatomas 0,033 ppm padauginus iš praskiedimo laipsnio.

    18. Flora, gonokokų, trichomonų tepinėlių paėmimo technika, citologinis tyrimas, KPI.

    Flora tepinėlio technika: medžiaga paimama iš gimdos kaklelio kanalo ir iš šlaplės specialiu šepetėliu, vizualiai kontroliuojant. Gautas mėginys nedelsiant dedamas ant stiklelio ir sutrinamas.

    Trichomono tepinėlių paėmimo technika: pirmiausia medžiaga paimama nubraukiant nuo šlaplės gleivinės (po pirminio jos masažo 1 min gaktos simfizėje) ir užpakalinės makšties fornikso, po to nuvaloma makšties kaklelio dalis. sterilus tamponas, sudrėkintas fiziologiniu tirpalu, pašalinamas gleivinės kamštis, in gimdos kaklelio kanalas atsargiai įkišamas zondas ne daugiau kaip 1,0-1,5 cm gyliu ir paimamas įbrėžimas iš gimdos kaklelio gleivinės.

    Gonokokų tepinėlio technika: medžiaga paimama iš šlaplės, Bartholin liaukų ir parauretrinių takų juos nuvalius vatos tamponu, suvilgytu fiziologiniu tirpalu, makšties pincetu ar specialiu zondu. Iš tiesiosios žarnos medžiaga imama buku šaukštu. Sergant lėtine ir audringa gonorėja, prieš tyrimą atliekama provokacija, siekiant padidinti patogeno nustatymo tikimybę.

    Jūs negalite paimti medžiagos su medvilniniu tamponu ir menstruacijų metu.

    Tepinėlių paėmimo citologiniam tyrimui technika: tepinėlis imamas nuo egzocervix, makšties ir vulvos paviršiaus mentele, nuo endocervix - endo šepetėliu. Medžiaga plonu sluoksniu užtepama ant specialiai apdoroto nugriebto stiklo ir apdorojama specialiu junginiu, kad ląstelės neišdžiūtų. Preparatai dažomi Papanicolaou metodu (vadinamuoju Pap tepinėliu) ir mikroskopuojami.

    Kariopiknozės indeksas- paviršiaus ląstelių, turinčių piknozinius branduolius, procentas nuo ląstelių su vezikuliniais (nepiknoziniais) branduoliais. CRPD folikulinės fazės pradžioje mėnesinių ciklas 25-30%, iki ovuliacijos 60-70%, liuteininėje fazėje sumažėja iki 25%.

    Šlapimas yra svarbus biologinis skystis žmogaus organizme. Su juo pašalinama dauguma mainų produktų. Sveikam žmogui jo sudėtis turi santykinai fiksuotas vertes. Susirgus pasikeičia kai kurie rodikliai, todėl gydantys gydytojai gali patikslinti diagnozę. Kasdienio šlapimo analizė baltymams padės nustatyti inkstų veiklos sutrikimus.

    Kasdienio šlapimo analizė arba paros diurezė

    Tai laboratorinis tyrimas, kurio metu nustatomas per dieną išsiskiriančio skysčio kiekis. Šis metodas naudojamas inkstų funkcionavimo būklei įvertinti. Šlapimo sudėtis:

    Kiekviename normos komponente turėtų būti tam tikras kiekis, nuo kurio nukrypimas laikomas patologija. Tiriant paros baltymų suvartojimą, suaugusių vyrų ir moterų norma yra vienoda. Esant normaliai inkstų funkcijai, šios medžiagos neturėtų patekti į šlapimą arba joje gali būti nedidelis 40-80 mg kiekis. 150 mg ar daugiau išskyrimas laikomas patologija. Tačiau su amžiumi, ypač po 60 metų, leidžiamas nedidelis perteklius. leistinas rodiklis, ir tai susiję su su amžiumi susiję pokyčiai organizme. Kai kuriais atvejais baltymai nustatomi dėl netinkamo paruošimo prieš renkant biomedžiagą arba mitybos klaidas. Vaikams norma priklauso nuo amžiaus, svorio ir kūno paviršiaus ploto.

    Bendra informacija

    Remiantis kasdienio šlapimo laboratorinių tyrimų rezultatais, gaunama ši informacija:

    • Skysčio tūris, kuris per dieną išsiskiria iš organizmo. Vidutiniškai jis yra 1750 ml ir gali svyruoti tiek aukštyn, tiek žemyn, priklausomai nuo išgeriamo skysčio kiekio.
    • Cukrus. Šis rodiklis ypač svarbus pacientams, sergantiems cukriniu diabetu.
    • Oksalatai. Leidžiamų ribų viršijimas yra kupinas smėlio ir akmenų susidarymo inkstuose.
    • Metanefrinas. Ši medžiaga susidaro suskaidžius hormonus. Nukrypimai nuo normos didėjimo kryptimi yra inkstų patologijos požymis, širdies ir kraujagyslių sistemos ir kt.
    • Baltymas. Sveikiems žmonėms šis rodiklis neturėtų būti stebimas šlapime. Tai vienas iš svarbių parametrų, kuris nustatomas atliekant kasdienę šlapimo analizę. Pervertintas lygis rodo inkstų patologijos požymius, centrinės nervų sistemos ligas. Be bendro baltymų kiekio, laboratorinis biologinio skysčio tyrimas taip pat leidžia aptikti baltymų junginius, kurie taip pat svarbūs teisingai diagnozei.

    Indikacijos dėl kasdienio šlapimo tyrimo dėl baltymų paskyrimo

    Atsižvelgiant į tai, kad kokybinės ir kiekybinės šlapimo sudėties pokyčiai prasideda anksčiau nei ligos simptomai, analizė leidžia laiku nustatyti patologiją. Indikacijos skirti tokio tipo tyrimus suaugusiems ir vaikams yra šios ligos:

    • amiloidozė (baltymų apykaitos pažeidimas);
    • diabetas;
    • nefropatija, pasireiškianti kojų patinimu;
    • širdies išemija;
    • inkstų nepakankamumas.

    Be to, jis skiriamas, kai pacientas vartoja tam tikrus vaistus: aminoglikozidus, AKF inhibitorius, tiazidinius diuretikus ir kai kuriuos kitus vaistus.

    Parengiamasis etapas

    Norint gauti daugiau informacijos ir gauti objektyviausią informaciją, pagrįstą kasdienio šlapimo baltymų analizės rezultatais, reikia laikytis tam tikrų taisyklių, kurios yra privalomos ir yra šios:

    • Dieną ar ilgiau nenaudokite vitaminų kompleksų, antikoaguliantų ir diuretikų.
    • Keiskite savo mitybą per dieną. Atsisakykite aštraus, riebaus ir saldaus maisto, taip pat alkoholinių ir kavos gėrimų.
    • Neaukokite biomedžiagos menstruacijų metu.
    • Norėdami surinkti šlapimą, vaistinėje įsigykite specialų indą arba galite naudoti stiklinis indas, kurio tūris ne mažesnis kaip trys litrai.

    baltymų analizei?

    Biomedžiagos rinkimo taisyklės yra bendros tiek suaugusiems vyrams ir moterims, tiek vaikams, sulaukusiems tam tikro amžiaus ir galintiems savarankiškai naudotis puoduku.

    1. Iš karto prieš renkant šlapimą būtina atlikti išorinių lytinių organų tualetą.
    2. Į pirmąją biomedžiagos dalį neatsižvelgiama. Tačiau rytinio šlapinimosi laikas yra fiksuotas.
    3. Surinkite visą išskirtą skystį per 24 valandas. Naktį taip pat tęsiasi šlapimo surinkimas.
    4. Tarą su biomedžiaga rekomenduojama laikyti ne aukštesnėje kaip 8 laipsnių ir ne žemesnėje kaip 5 laipsnių temperatūroje.
    5. Iškart išgėrus paskutinę porciją, surinktą šlapimą reikia gerai išmaišyti.
    6. Prieš tai gydytojas turėtų paaiškinti, kaip atlikti kasdieninį šlapimo tyrimą dėl baltymų laboratorijoje. Yra du būdai. Į indą supilama apie 100 ml biomedžiagos mažas dydis ir nuneškite į laboratoriją arba galite pristatyti visą paros kiekį dideliame inde.
    7. Tuo atveju, kai svarbus diurezės pokytis per dieną, gydytojas rekomenduoja per 24 valandas nustatyti suvartoto skysčio kiekį.

    Kaip surinkti kasdieninį baltymų tyrimą šlapime vaikams iki vienerių metų? Šis klausimas domina jaunas mamas. Skiriant tokį tyrimą kūdikiams, pediatrams patariama įsigyti specialų biomedžiagos rinkimo aparatą, kuris laisvai parduodamas vaistinėse. Nespauskite skysčio iš sauskelnių ir neužfiksuokite momento, kai kūdikis nori šlapintis.

    Proteinurija arba baltymai kasdieniniame šlapime

    Šis terminas reiškia didelį baltyminių medžiagų kiekį šlapime. Jis stebi inkstų veiklą. Yra šie proteinurijos tipai. Šviesa – nėra ligų pranašas ir atsiranda dėl natūralių priežasčių. Vidutinis ir sunkus - šios rūšys rodo inkstų veiklos sutrikimus. Tokiais atvejais, be baltymų kasdieniniame šlapimo tyrime, yra ir tokių simptomų:

    • kaulų skausmas;
    • galvos svaigimas;
    • apetito praradimas;
    • mieguistumas;
    • pykinimas;
    • vėmimas;
    • stiprus nuovargis.

    Baltymų atsiradimo šlapime priežastys:

    • širdies nepakankamumas;
    • centrinės nervų sistemos ligos;
    • hipertiroidizmas;
    • infekcinis endokarditas.

    Šlapimo sudėties pasikeitimą rodo jo atspalvis, balkšvos spalvos atsiradimas rodo, kad yra albumino, baltyminės medžiagos.

    Proteinurijos tipai

    Pagrindinis veiksnys, turintis įtakos baltymų junginių atsiradimui šlapime, yra šios medžiagos įsisavinimo sutrikimas. Atskirkite proteinuriją:

    • vamzdinis. Kai kurių ligų atveju baltymų pasisavinimas yra neįmanomas arba sunkus.
    • Glomerulinis. Šiuo atveju baltymų molekulės neužsilieka ir išsiskiria kartu su skysčiu. Šis reiškinys būdingas šioms patologijoms: pielonefritas, inkstų pažeidimas toksinais, glomerulonefritas.
    • Ekstrarenalinis. Esama žala šlapimo takų būdingas uretritui, kolpitui ir cistitui.

    Norint nustatyti proteinurijos tipą, naudojamas jos mikroskopinis tyrimas. Be to, jei reikia, gydytojas skiria kitų tipų tyrimus, įskaitant ultragarsą, magnetinio rezonanso tomografiją ir kitus aparatūros metodus.

    Baltymai šlapime nėštumo metu. Priežastys

    Baltymai yra statybinė medžiaga, dalyvaujanti įvairiuose žmogaus organizme vykstančiuose procesuose. Jo aptikimas šlapime laikomas patologinių procesų vystymosi požymiu. Inkstų kūneliai praranda vientisumą ir baltymai patenka į šlapimą kartu su kenksmingomis medžiagomis, o šio gedimo priežastis – uždegiminis inkstų procesas. Šlapimo analizė leidžia laiku atpažinti ligą, įsitikinti teisingas darbas inkstai atsakingiausiu ir svarbiausiu moters gyvenimo periodu. Bet koks, net ir pats nereikšmingiausias baltymų aptikimas nėščioms moterims atliekant kasdienį šlapimo tyrimą, yra patologijos vystymosi pradžios požymis. Jo atsiradimo priežastys yra šios ligos:

    • glomerulonefritas;
    • raudonoji vilkligė;
    • nefritas;
    • hipertenzija;
    • diabetas diabetas.

    Taip pat infekciniai ir uždegiminiai procesai inkstuose, jų mechaniniai sužalojimai, nudegimai, hipotermija, apsinuodijimas toksinėmis medžiagomis arba piktybinių navikų gydymas chemoterapiniais vaistais prieš nėštumą.

    Saugus nėštumas

    Norint diagnozuoti inkstų ligas, naudojamas paprastas metodas – tai kasdienis šlapimo tyrimas baltymams nustatyti. Sąlygų laikymasis tinkamas surinkimasšlapimas yra būtinas kiekvienai padėtyje esančiai moteriai.

    1. Išoriniai lytiniai organai turi būti švarūs. Galite plauti įprastu muilu. Draudžiama naudoti antiseptikus ar augalinius preparatus, nes jie iškreips rezultatų patikimumą.
    2. Surinkite šlapimą į švarų, sausą indą plačiu kaklu.

    Jei šlapime aptinkamas baltymas, gydytojas paskiria gydymą, kuris apsaugos vaisius nuo neigiamo ligos, dėl kurios šlapime atsirado baltyminių medžiagų, padarinių. Toliau turėtumėte išsiaiškinti šio reiškinio priežastį. Daugeliu atvejų tai yra inkstų pažeidimas. Baltymų atsiradimas biomedžiagoje antroje nėštumo pusėje yra vienas iš preeklampsijos simptomų. Tada prisijungia edema, kraujospūdžio kritimai.

    • kasdienis šlapimo tyrimas dėl baltymų;
    • reguliarūs vizitai pas gydytoją;
    • slėgio valdymas;
    • mityba, sustiprinta vitaminų kompleksais;
    • saikingas skysčių suvartojimas;
    • atsisakymas prieskonių ir, jei įmanoma, druskos arba jos kiekio sumažinimas iki minimumo.

    Prevenciniais tikslais, taip pat baltymų junginių kiekiui šlapime sumažinti, gydytojas gali skirti vaistažolių preparatų ar vaistažolių nuovirų, turinčių diuretikų poveikį.

    Gydymas ir profilaktika

    Analizės aiškinimas turėtų būti patikėtas gydytojui. Aptikimo atveju patologinės priežastys baltyminių medžiagų atsiradimas šlapime, reikalinga tik reikalinga terapija medicinos darbuotoja. Nerekomenduojama savarankiškai gydytis ir įsitraukti netradiciniai metodai. Nustatydami priežastis, nesusijusias su patologiniais procesais, jos duoda Ypatingas dėmesys dieta. Svarbu atsiminti, kad terapijos veiksmingumas priklauso nuo savalaikės diagnozės.

    26.02.2009

    Kurilyak O.A., mokslų daktaras

    Paprastai baltymai išsiskiria su šlapimu palyginti nedideliu kiekiu, paprastai ne daugiau kaip 100-150 mg per parą.

    Sveiko žmogaus paros diurezė yra 1000–1500 ml per dieną; taigi baltymų koncentracija fiziologinėmis sąlygomis yra 8-10 mg/dL (0,08-0,1 g/l).

    Bendrą baltymų kiekį šlapime sudaro trys pagrindinės frakcijos - albuminai, mukoproteinai ir globulinai.

    Šlapimo albuminas yra ta serumo albumino dalis, kuri buvo filtruojama glomeruluose ir nebuvo reabsorbuota inkstų kanalėliuose; normalus albumino išsiskyrimas su šlapimu yra mažesnis nei 30 mg per parą. Kitas pagrindinis baltymų šaltinis šlapime yra inkstų kanalėliai, ypač distalinė kanalėlių dalis. Šie kanalėliai išskiria du trečdalius viso šlapimo baltymo; maždaug 50 % šio kiekio sudaro Tamm-Horsfall glikoproteinas, kurį išskiria distalinių kanalėlių epitelis ir kuris atlieka svarbų vaidmenį formuojant šlapimo akmenis. Kitų baltymų yra šlapime mažas kiekis ir kilę iš inkstuose filtruotų mažos molekulinės masės plazmos baltymų, kurie nėra reabsorbuojami inkstų kanalėliuose, inkstų kanalėlių epitelio (RTE) mikroglobulinų ir prostatos bei makšties sekretų.

    Proteinurija, ty baltymų kiekio padidėjimas šlapime, yra vienas iš svarbiausių simptomų, atspindinčių inkstų pažeidimą. Tačiau daug kitų būklių taip pat gali lydėti proteinurija. Todėl yra dvi pagrindinės proteinurijos grupės: inkstų (tikroji) ir ekstrarenalinė (klaidinga) proteinurija.

    Sergant inkstų proteinurija, baltymas į šlapimą patenka tiesiai iš kraujo, nes padidėja glomerulų filtro pralaidumas. Inkstų proteinurija dažnai nustatoma sergant glomerulonefritu, nefroze, pielonefritu, nefroskleroze, inkstų amiloidoze, įvairių formų nefropatijos, tokios kaip nėščių moterų nefropatija, karščiavimas, hipertenzija ir kt. Proteinurija gali pasireikšti ir sveikiems žmonėms po didelio fizinio krūvio, hipotermijos, psichologinio streso. Naujagimiams fiziologinė proteinurija stebima pirmosiomis gyvenimo savaitėmis, o esant vaikų ir paauglių astenijai, kartu su sparčiu augimu 7–18 metų amžiaus, galima ortostatinė proteinurija (stačioje kūno padėtyje).

    Esant klaidingai (ekstrarenalinei) proteinurijai, baltymų šaltinis šlapime yra leukocitų, eritrocitų, epitelio ląstelių mišinys. šlapimo takų urotelis. Šių elementų skilimas, ypač ryškus šarminėje šlapimo reakcijoje, sukelia baltymų patekimą į šlapimą, kuris jau praėjo inkstų filtrą. Ypač aukštas laipsnis klaidinga proteinurija sukelia kraujo priemaišą šlapime, o esant gausiai hematurijai jis gali siekti 30 g / l ar daugiau. Ligos, kurios gali būti susijusios ekstrarenalinė proteinurija- urolitiazė, inkstų tuberkuliozė, inkstų ar šlapimo takų navikai, cistitas, pyelitas, prostatitas, uretritas, vulvovaginitas.

    Klinikinė klasifikacija apima lengvą proteinuriją (mažiau nei 0,5 g per parą), vidutinio sunkumo (0,5–4 g per dieną) arba sunkią (daugiau nei 4 g per dieną).

    Daugumai pacientų, sergančių inkstų ligomis, pvz., ūminiu glomerulonefritu ar pielonefritu, pasireiškia lengva proteinurija, tačiau pacientai, sergantys nefroziniu sindromu, paprastai kasdien su šlapimu išskiria daugiau nei 4 g baltymų.

    Baltymų kiekybiniam nustatymui naudojami įvairūs metodai, ypač vieningas Brandberg-Roberts-Stolnikov metodas, biureto metodas, metodas naudojant sulfosalicilo rūgštį, metodai naudojant Coomassie mėlynus dažus, pirogalolio raudonuosius dažus ir kt.

    Naudojant įvairius metodus baltymų kiekiui šlapime nustatyti, kilo rimta painiava aiškinant normalaus baltymų kiekio šlapime ribas. Kadangi laboratorijose dažniausiai naudojami 2 metodai - su sulfosalicilo rūgštimi ir pirogalolio raudonaisiais dažais, mes apsvarstysime jiems nustatytų normų ribų teisingumo problemą. Iš sulfosalicilo metodo padėties normaliame šlapime baltymų kiekis neturi viršyti 0,03 g / l, iš pirogalolio metodo padėties - 0,1 g / l! Skirtumai trigubai!

    Mažos baltymų koncentracijos šlapime normos vertės vartojant sulfosalicilo rūgštį atsiranda dėl šių punktų:

    • kalibravimo kreivė sudaryta ant vandeninio albumino tirpalo. Šlapimas savo sudėtimi labai skiriasi nuo vandens: pH, druskos, mažos molekulinės masės junginiai (kreatininas, karbamidas ir kt.). Dėl to, pasak Altshulerio, Rakovo ir Tkachevo, baltymų kiekio šlapime nustatymo klaida gali būti 3 ar daugiau kartų! Tie. teisingus nustatymo rezultatus galima gauti tik tais atvejais, kai šlapime yra labai mažai specifinė gravitacija ir savo sudėtimi bei pH artėja prie vandens;
    • didesnis sulfosalicilo metodo jautrumas albuminui, palyginti su kitais baltymais (tuo tarpu, kaip minėta aukščiau, albuminas normaliuose šlapimo mėginiuose neviršija 30% viso šlapimo baltymo);
    • jei šlapimo pH pasislenka į šarminę pusę, sulfosalicilo rūgštis neutralizuojama, dėl to taip pat nuvertinami baltymų nustatymo rezultatai;
    • nuosėdų nusėdimo greitis labai kinta - esant žemai baltymų koncentracijai krituliai sulėtėja, o anksti sustabdžius reakciją, rezultatas neįvertinamas;
    • nusodinimo reakcijos greitis iš esmės priklauso nuo reakcijos mišinio sumaišymo. Esant didelei baltymų koncentracijai, intensyviai kratant mėgintuvėlį gali susidaryti dideli dribsniai ir greitai nusėsti.

    Visos aukščiau išvardintos metodo ypatybės lemia reikšmingą šlapime nustatytos baltymų koncentracijos nepakankamumą. Nepakankamo įvertinimo laipsnis labai priklauso nuo konkretaus šlapimo mėginio sudėties. Kadangi taikant sulfosalicilo rūgšties metodą gaunamos nepakankamai įvertintos baltymų koncentracijos, šio metodo norma – 0,03 g/l – taip pat yra maždaug tris kartus neįvertinta, palyginti su duomenimis, pateiktais užsienio žinynuose apie klinikinę laboratorinę diagnostiką.

    Didžioji dauguma Vakarų šalių laboratorijų atsisakė sulfosalicilo metodo baltymų koncentracijai šlapime nustatyti ir tam aktyviai naudoja pirogalolio metodą. Baltymų koncentracijos šlapime ir kituose biologiniuose skysčiuose nustatymo pirogalolio metodas pagrįstas fotometriniu principu matuojant spalvoto komplekso, susidarančio baltymų molekulėms sąveikaujant su pirogalolio raudonojo dažų komplekso ir natrio molibdato komplekso molekulėmis, optinį tankį. Pirogalolio raudonojo molibdato kompleksas).

    Kodėl pirogalolio metodas suteikia tikslesnius šlapimo baltymų matavimus? Pirma, dėl didesnio šlapimo mėginio praskiedimo reakcijos mišinyje. Jei taikant sulfosalicilo metodą šlapimo mėginio / reagento santykis yra 1/3, tai pirogalolio metodu jis gali svyruoti nuo 1/12,5 iki 1/60, priklausomai nuo metodo varianto, o tai žymiai sumažina šlapimo sudėties poveikį. matavimo rezultatas. Antra, reakcija vyksta sukcinato buferyje, ty esant stabiliam pH. Ir galiausiai pats metodo principas, galima sakyti, yra „skaidresnis“. Natrio molibdatas ir pirogalolio raudonasis dažiklis sudaro kompleksą su baltymo molekule. Tai lemia tai, kad laisvos būsenos dažų molekulės, kurios nesugeria šviesos, kai bangos ilgis 600 nm, sugeria šviesą kartu su baltymu. Taigi, kiekvieną baltymo molekulę pažymime dažais ir dėl to pastebime, kad reakcijos mišinio optinio tankio pokytis esant 600 nm bangos ilgiui aiškiai koreliuoja su baltymo koncentracija šlapime. Be to, kadangi pirogalolio raudonojo afinitetas skirtingoms baltymų frakcijoms yra beveik vienodas, šis metodas leidžia nustatyti bendrą šlapimo baltymą. Todėl baltymų koncentracijos šlapime normalių verčių riba yra 0,1 g/l (tai nurodyta visose šiuolaikinėse Vakarų klinikinės ir laboratorinės diagnostikos gairėse, įskaitant N. Titzo redaguojamą klinikinį laboratorinių tyrimų vadovą). Lyginamosios charakteristikos pirogalolio ir sulfosalicilo metodai baltymų kiekiui šlapime nustatyti pateikti 1 lentelėje.

    Baigdamas norėčiau dar kartą atkreipti dėmesį į tai, kad laboratorijai perėjus nuo sulfosalicilo metodo baltymui šlapime nustatyti prie pirogalolio metodo, normalių verčių riba žymiai padidėja (nuo 0,03 g/l iki 0,1 g). /l!). Laboratorijos darbuotojai būtinai turi apie tai informuoti gydytojus, nes. Esant tokiai situacijai, proteinurijos diagnozę galima atlikti tik tada, kai baltymų kiekis šlapime viršija 0,1 g/l.

    Bibliografija.

    1. Altshuler B.Yu., Rakov S.S., Tkachev G.A. // Klausimas. medus. chemija. - 2001. - Nr. 4. - C.426-438.
    2. Kim Yu.V., Potekhin O.E., Tokar M.I., Shibanov A.N. // Lab. medus. - 2003. - Nr. 6. - C.94-98.
    3. Klinikinis laboratorinių tyrimų vadovas, red. N. Titsa.- M.- Unimed-press.-2003.- 942 p.
    4. Kozlovas A.V., Slepyševa V.V. Baltymų nustatymo šlapime metodai: galimybės ir perspektyvos // VII met. darbų rinkinys. SPb nefrolis. seminaras. – Sankt Peterburgas: TNA. - 1999. - C.17-28.
    5. Pupkova V.I., Pikalovas I.V., Chrykina E.N., Kharkovskiy A.V. // Naujienos "Vector-Best". - 2003. - Nr.4 (30).
    6. Chambers R.E., Bullock D.G., Whoer J.T. // Ann. Clin. Biochem. - 1991. - T. 28 (5 punktas). - P.467-473.
    7. Klinikinės laboratorijos medicina. Red. pateikė Kennethas D. McClatchey. - 2 leid.-2001.- 1993p.
    8. Eppel G.A., Nagy S., Jenkins M.A., Tudball R.N., Daskalakis M., Balazs N.D.H., Comper W.D. // klinika. Biochem. - 2000. - T. 33.-P.487-494.
    9. Franke G., Salvati M., Sommer R.G. Šlapimo baltymų tyrimo sudėtis ir prietaisas bei to paties naudojimo būdas // JAV patentas Nr. 5326707. – 1994 m.
    10. Kaplanas I.V., Levinsonas S.S. // klinika. Chem. - 1999. - T. 45.-P.417-419.
    11. Kashif W., Siddiqi N., Dincer H.E., Dincer A.P., Hirsch S. // Cleveland Clin. J. iš Med. - 2003. - T. 70 straipsnio 6 dalį. - P.535-547.
    12. Koerbin G, Taylor L, Dutton J, Marshall K, Low P, Potter JM. // klinika. Chem. - 2001. - T. 47.-P.2183-2184.
    13. Le Bricon T., Erlich D., Dussaucy M., Garnier J.P., Bousquet B. // Straipsnis prancūzų kalba. - Ann. Biol. Clin. (Paryžius). - 1998. - T. 56 straipsnio 6 dalį. - P.719-723.
    14. Marshall T., Williams K.M. // klinika. Chem. - 2003. - T. 49 straipsnio 12 dalį. - P.2111-2112.
    15. Pugia M., Newman D.J., Lott J.A., D'Mello L., Clark L., Profitt J.A., Cast T. // Clin. Chim. acta. - 2002. - T. 326 (1-2). - P.177-183.
    16. Ringsrud K.M., Linne J.J. Šlapimo analizė ir kūno skysčiai: „ColorText“ ir „Atlas“ // Mosby. - 1995. - P.52-54.
    17. Shepard M.D., Penberthy L.A. // klinika. Chem. - 1987. - T. 33.-P.792-795.
    18. Williams K.M., Marshall T. // J. Biochem. Biofizė. metodus. - 2001. - T. 47.-P.197-207.
    19. Williams K.M., Arthur S.J., Burrell G., Kelly F., Phillips D.W., Marshall T. // J. Biochem. Biofizė. metodus. - 2003. - T. 57 straipsnio 1 dalį. - P.45-55.
    Panašūs straipsniai